[發(fā)明專利]一種前脂肪細胞的分離方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110381028.4 | 申請日: | 2021-04-09 |
| 公開(公告)號: | CN113174367A | 公開(公告)日: | 2021-07-27 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 萬榮 | 申請(專利權(quán))人: | 百色學(xué)院 |
| 主分類號: | C12N5/077 | 分類號: | C12N5/077 |
| 代理公司: | 北京邦中知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11827 | 代理人: | 付佳 |
| 地址: | 533000 廣西*** | 國省代碼: | 廣西;45 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 脂肪 細胞 分離 方法 | ||
1.一種前脂肪細胞的制備方法,其特征在于,所述的方法包括步驟:
(1)將脂肪與Ⅰ型膠原酶溶液混合后進行孵育消化,得到消化液;
(2)所述的消化液經(jīng)中和液中和后,過濾,得到濾液;
(3)所述濾液經(jīng)離心后,收集沉淀,得到前脂肪細胞。
2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步驟(1)中,所述的脂肪與所述Ⅰ型膠原酶溶液的重量比為0.5-1.5:0.5-1.5,較佳地0.8-1.2:0.8-1.2,更佳地1:1。
3.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步驟(1)中,在所述Ⅰ型膠原酶溶液中,Ⅰ型膠原酶的含量為0.5-1mg/mL,較佳地0.8mg/mL,更佳地1mg/mL。
4.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步驟(1)中,所述孵育消化的溫度為20-40℃,較佳地30-37℃,更佳地37℃。
5.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步驟(1)中,所述孵育消化的時間為0.5-1.5h,較佳地0.8-1.2h,更佳地1h。
6.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步驟(2)中,所述的中和液包括添加有FBS的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
7.如權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于,在所述添加有FBS的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,F(xiàn)BS的含量為5-15v/v%,較佳地8-12v/v%,更佳地10v/v%。
8.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步驟(2)中,所述的中和液與所述的消化液的體積比0.5-1.5:0.5-1.5,較佳地0.8-1.2:0.8-1.2,更佳地1:1。
9.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步驟(3)中,得到的所述前脂肪細胞經(jīng)添加有FBS的基礎(chǔ)培養(yǎng)重懸,得到前脂肪細胞重懸液。
10.一種前脂肪細胞,其特征在于,所述的前脂肪細胞通過如權(quán)利要求1所述的方法制備獲得。
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