[發明專利]一種含有π-π共軛吡啶基脂質衍生物及制備方法、應用

有效

• 申請號: 202110378732.4
• 申請日: 2021-04-08
• 公開（公告）號: CN113072582B
• 公開（公告）日: 2022-10-11
• 發明（設計）人: 凌龍兵;徐晨;單琪;杜源;祝艷平;孫東起;鄭海濤
• 申請（專利權）人: 煙臺大學
• 主分類號: C07F9/58
• 分類號: C07F9/58;A61K9/127;A61K31/704;A61K47/54;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 馬國冉

1.一種含有π-π共軛吡啶基脂質衍生物，其特征在于，具有如下結構：

。

2.一種如權利要求1所述的含有π-π共軛吡啶基脂質衍生物的合成方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1，將巰基烷酸溶解于反應溶劑中，攪拌下逐滴加入保護試劑的二氯甲烷溶液，保護試劑與巰基烷酸的反應投料摩爾比為1:1-1:5，室溫反應4-12 h；反應結束后，旋蒸除去二氯甲烷，濃縮后，重結晶純化，得到三苯基醚保護的巰基烷酸；

步驟2，將三苯基醚保護的巰基烷酸溶解于反應溶劑中，攪拌下加入偶合試劑，兩者投料摩爾比為1:1-1:2.5，35-45℃活化反應2-4 h；加入甘油磷酸膽堿和催化劑，反應12-14h；用含有10%冰醋酸的乙醚溶液沉降反應液，濃縮后用洗脫溶劑三氯甲烷/甲醇/水體積比為：v/v/v=65:25:4柱層析，得到雙三苯基醚保護巰基烷酸甘油磷脂酰膽堿；

步驟3，將雙三苯基醚保護巰基烷酸甘油磷脂酰膽堿溶解于脫保護試劑，脫保護時間為1.5-3 h；在50℃下，旋轉蒸發法除去脫保護試劑；將上述得到的脫保護的雙巰基長碳鏈磷脂酰膽堿溶解于反應溶劑，攪拌下加入二硫二吡啶，脫保護的雙巰基長碳鏈磷脂酰膽堿和二硫二吡啶兩者摩爾比1:2.5-1:6，升溫至35-45℃，反應24-48 h；反應結束后，濃縮后用洗脫溶劑三氯甲烷/甲醇/水體積比為：v/v/v=65:25:4柱層析，得到含有π-π共軛吡啶基脂質衍生物。

3.如權利要求2所述的含有π-π共軛吡啶基脂質衍生物的合成方法，其特征在于，步驟1中，所述保護試劑為三苯基氯甲烷；所述巰基烷酸為巰基十一烷酸、巰基十二烷酸或巰基十六烷酸；所述反應溶劑為二氯甲烷、甲苯、氯仿或二甲基甲酰胺；所述重結晶純化中的重結晶溶劑為乙酸乙酯、乙腈或石油醚。

4.如權利要求2所述的含有π-π共軛吡啶基脂質衍生物的合成方法，其特征在于，步驟2中，所述反應溶劑為二甲基亞砜、二氯甲烷或二甲基亞砜和二氯甲烷的混合物；所述偶合試劑為N,N'-羰基二咪唑或1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯；硅膠柱色譜純化，得到白色蠟狀固體雙巰基保護的長碳鏈磷脂酰膽堿，所述洗脫溶劑為三氯甲烷、甲醇、水體積比為65:25:4混合物。

5.如權利要求2所述的含有π-π共軛吡啶基脂質衍生物的合成方法，其特征在于，步驟3中，所述脫保護試劑為三氟乙酸、氯甲烷溶液體積比為1:1混合物；所述脫保護試劑與雙巰基保護的長碳鏈磷脂酰膽堿的摩爾比為5:1-10:1，50℃進行反應；所述反應溶劑為二氯甲烷、甲醇、三氯甲烷或二甲基甲酰胺；硅膠柱色譜純化，得到白色蠟狀固體，所述洗脫溶劑為三氯甲烷、甲醇、水體積比為65:25:4的混合物。

6.一種由權利要求1所述的含有π-π共軛吡啶基脂質衍生物制備的空白功能化脂質體，其特征在于，該脂質體的平均粒徑120-300 nm，呈球形，大小均一。

7.如權利要求6所述的含有π-π共軛吡啶基脂質衍生物制備的空白功能化脂質體的制備方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

1）將含有π-π共軛吡啶基脂質衍生物與助磷脂按照一定摩爾比溶解于三氯甲烷、甲醇按著體積比為4:1的溶液中，含有π-π共軛吡啶基脂質衍生物的濃度為1.5-4 mg/mL，所述含有π-π共軛吡啶基脂質衍生物與大豆卵磷脂、膽固醇和DSPE-PEG2000的摩爾比為50-60:30-45:32-45:4-8；

2）脂質溶液在N₂氛圍下均勻分散成膜，35℃真空干燥10-14 h；

3）利用去離子水或磷酸鹽緩沖液進行脂質水化， 50-60℃水化1-3 h；經超聲處理和0.22μm微孔濾膜過濾，得到濃度為1.5-4 mg/mL的π-π共軛吡啶基功能化脂質體，保存于4℃，即可。