[發(fā)明專利]一種丹麥木槿的組培再生方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110377175.4
• 申請日: 2021-04-08
• 公開（公告）號: CN112931217B
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 侯金艷;吳麗芳;王萍;王大成;蘇鵬飛;丁雙雙
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院合肥物質(zhì)科學(xué)研究院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 合肥市浩智運(yùn)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 34124
• 代理人: 葉濛濛

本發(fā)明公開一種丹麥木槿的組培再生方法，涉及丹麥木槿技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明包括以下步驟：以丹麥木槿優(yōu)良株系的當(dāng)年生幼嫩的帶腋芽莖段為外植體，經(jīng)表面消毒后進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo)和增殖培養(yǎng)；待不定芽伸長至2～3cm并伴有2～4片完整葉片時，進(jìn)行瓶內(nèi)或瓶外不定根誘導(dǎo)，最終獲得完整的丹麥木槿再生植株。本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明對丹麥木槿優(yōu)良株系的規(guī)模化繁殖及品種改良研究具有重要意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及丹麥木槿技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種丹麥木槿的組培再生方法。

背景技術(shù)

丹麥木槿為錦葵科木槿屬多年生植物，作為木槿的改良新品種，不僅葉色濃綠，花色豐富，花期長(開花后只要保證充足的營養(yǎng)條件即可實(shí)現(xiàn)周年開花)；而且適應(yīng)性較強(qiáng)，室內(nèi)室外均可栽培，具有極高的觀賞價值和經(jīng)濟(jì)價值。

近年來，隨著人們生活水平的提高和市場對丹麥木槿的需求的增加，使得丹麥木槿的產(chǎn)業(yè)化栽培發(fā)展面臨著前所未有的機(jī)遇。但缺乏高效的優(yōu)質(zhì)種苗繁育技術(shù)，成為制約其產(chǎn)業(yè)化開發(fā)的瓶頸。

公開號為CN 107006326A的專利公開一種丹麥木槿優(yōu)良株系高效繁育的方法，對丹麥木槿優(yōu)良株系進(jìn)行高效繁育，但目前在生產(chǎn)上，丹麥木槿的繁殖主要是通過從國外引進(jìn)種苗，存在成本較高，嚴(yán)重限制了丹麥木槿的規(guī)模化繁育、推廣及后期的品種改良。由于植物組培快繁技術(shù)，可在短期內(nèi)獲得大量的、遺傳背景一致的優(yōu)良種苗，一方面在一定程度上能夠滿足規(guī)模化種植對丹麥木槿優(yōu)質(zhì)種苗的需求；另一方面在此技術(shù)基礎(chǔ)上，后期可以實(shí)現(xiàn)對丹麥木槿優(yōu)良品種的遺傳改良工作。但目前有關(guān)利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)對丹麥木槿進(jìn)行繁育的研究尚屬空白。

因此，針對上述丹麥木槿繁育所存在的諸多問題，急需開發(fā)一種丹麥木槿高效組培再生的方法，以滿足對丹麥木槿優(yōu)良株系的快速繁殖和品種改良的需求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于運(yùn)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，提供一種丹麥木槿高效組培再生的方法。

本發(fā)明通過以下技術(shù)手段實(shí)現(xiàn)解決上述技術(shù)問題：

一種丹麥木槿的組培再生方法，包括以下步驟：

(1)以丹麥木槿的當(dāng)年生幼嫩帶腋芽莖段為外植體，對其表面進(jìn)行消毒處理；

(2)將消毒后莖段切成適宜大小的切段，接種于不定芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo)；

(3)光照培養(yǎng)3～4周后，將誘導(dǎo)出不定芽叢的莖段轉(zhuǎn)接于伸長培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽的伸長培養(yǎng)；

(4)光照培養(yǎng)2～3周后，待芽長至2～3cm并伴有2-3個葉片時進(jìn)行瓶內(nèi)或瓶外生根誘導(dǎo)，獲得具有健壯根系的丹麥木槿再生植株；所述瓶外生根誘導(dǎo)是將不定芽的形態(tài)學(xué)下端置于添加有10～25mM褪黑素和100～500mg/L IAA的生根促進(jìn)液中處理20-60s，然后將形態(tài)學(xué)下端定植于育苗盤中，進(jìn)行瓶外生根誘導(dǎo)。

有益效果：繁育過程采用莖段直接誘導(dǎo)不定芽，不定芽伸長后一方面采取瓶內(nèi)生根，為后期的分子遺傳改良奠定基礎(chǔ)；另一方面也可以直接進(jìn)行瓶外生根，在提高繁育系數(shù)的同時，避免了組培苗瓶內(nèi)生根和后期的馴化移栽，大大降低繁育的復(fù)雜程度，縮短繁育周期。

再生效率高，叢生芽誘導(dǎo)率最高達(dá)98.4％，平均每個外植體最高可產(chǎn)生8.5個不定芽，且不定芽瓶外生根率最高達(dá)到98.6％；且能實(shí)現(xiàn)對獲得的無菌苗莖段進(jìn)行進(jìn)一步的擴(kuò)大繁殖，為優(yōu)良丹麥木槿株系的快速繁殖和遺傳改良提供了重要的技術(shù)支撐。

當(dāng)褪黑素和IAA結(jié)合使用時，二者具有協(xié)同作用，能夠大大提高不定根的誘導(dǎo)效果；且生根促進(jìn)液的處理時間超過60s時，不定根的誘導(dǎo)效果逐漸減弱，表現(xiàn)為不定根的誘導(dǎo)率下降，不定根的個數(shù)逐漸減少及不定根的長度逐漸變短趨勢。

莖段為取材于丹麥木槿株系當(dāng)年生幼嫩枝條，一方面能保持母本植株的種質(zhì)特性；另一方面取材方便、材料豐富；可以實(shí)現(xiàn)對丹麥木槿優(yōu)良單株的快速繁育。