[發明專利]一種復合微生物制劑及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110374152.8
• 申請日: 2021-04-07
• 公開（公告）號: CN113073062B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發明（設計）人: 龍章德;薛云;李季剛;魏濤;劉啟斌;劉鴻;孫建生;寧振興;蘇贊;胡志忠;毛多斌
• 申請（專利權）人: 廣西中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/16;A24B15/20;A24B15/18;C12R1/865;C12R1/01
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 李紅團

本發明涉及農業微生物技術領域，具體涉及一種復合微生物制劑及其制備方法和應用。所述復合微生物制劑采用市售釀酒酵母和中國普通微生物菌種保藏管理中心保藏的保藏編號為CGMCC NO.13905的嗜麥芽寡養單胞菌，經菌種活化、制備發酵液、離心、復配等步驟制備而成。煙葉經過所述復合微生物制劑發酵后，煙葉化學成分協調性改善，巨豆三烯酮等6種致香成分含量明顯增加，新生成了1?己烯?3?醇等6種致香物質成分，煙葉品質明顯提升。

技術領域

本發明涉及農業微生物技術領域，具體涉及一種復合微生物制劑及其制備方法和應用。

背景技術

煙葉發酵是提高煙葉可用性和卷煙感官質量的一種加工方法，經發酵后的煙葉，可以彌補煙葉本身不同程度的品質缺陷，如減輕煙葉本身的青雜氣、降低刺激性，提升卷煙香氣質和香氣量，改善抽吸時的余味和吸味等。合適的發酵工藝可以極大改善煙葉的品質，提高卷煙質量，是卷煙加工中極為重要的步驟。

煙葉中含有上千種各種各樣的化合物，包括非揮發性的大分子物質比如纖維素、淀粉、蛋白質以及果膠等；也含有大量的半揮發性和揮發性的小分子物質，比如各種酸類、醇類、醛類以及酯類等化合物。這些化合物的種類和含量比例決定了煙葉的品質。其中，淀粉是一類對煙葉品質影響比較大的多糖。煙葉淀粉含量過高，在煙支燃燒時會影響燃燒速度和燃燒的完全性，而且會產生焦糊味和雜氣，降低卷煙的感官質量。而小分子的醇類、醛類、酯類、酮類、吡啶類以及吡嗪類等物質則對煙葉的香氣品質有重要影響。

煙葉發酵過程與其表面存在大量并且種類繁多的微生物密切相關。在煙葉發酵過程中，這些微生物可以將煙葉中的一些大分子物質如蛋白質、淀粉降解為單糖和氨基酸等一些小分子，然后這些小分子物質在經過一系列反應可以生成醇、醛、酸、酯、酮等香味成分。篩選合適的微生物用于發酵煙葉，將煙葉中的淀粉轉化為還原糖，可以減少卷煙的雜氣，改善口感。利用微生物在煙葉發酵過程中代謝生成各種與煙氣相諧調的香味物質，使煙葉化學成分間趨于協調，則可以提高煙葉的香氣品質。

發明內容

因此，本發明要解決的技術問題在于提高煙葉的香氣品質，從而提供一種復合微生物制劑、制備復合微生物制劑的方法、復合微生物制劑在煙葉發酵和/或提高煙葉的香氣品質中的應用。

第一方面：本發明提供一種復合微生物制劑，包含釀酒酵母和嗜麥芽寡養單胞菌；釀酒酵母和嗜麥芽寡養單胞菌的活菌數比為1：2至2：1。

可選的，釀酒酵母和嗜麥芽寡養單胞菌的活菌數比為1：1。

可選的，所述釀酒酵母為購自安琪酵母股份有限公司的耐高溫釀酒高活性干酵母。

可選的，所述嗜麥芽寡養單胞菌為中國普通微生物菌種保藏管理中心保藏的保藏編號為CGMCC NO.13905的菌株。

第二方面：一種制備復合微生物制劑的方法，所述復合微生物制劑的制備方法包括如下步驟：

(1)制備發酵液，將活化后的釀酒酵母和嗜麥芽寡養單胞菌分別接種到發酵培養基中發酵制備得到發酵液；

(2)將兩株菌的發酵液復配。

可選的，所述步驟(2)具體包括如下步驟：將發酵液離心，除去上清液，收集濕菌體，重懸菌體得菌液，按比例將兩株菌的菌液進行復配；

可選的，所述方法還包括菌種活化培養的步驟：分別挑取釀酒酵母和嗜麥芽寡養單胞菌菌株，接種到活化培養基中進行活化，即得活化后的釀酒酵母和嗜麥芽寡養單胞菌；

所述活化培養基為PDA培養基；活化培養時間為12h至72h；活化培養的溫度為28-30℃；

可選的，制備發酵液的步驟中還包括制備種子液的步驟，包括將活化后的釀酒酵母接種到M1培養基中，25℃至35℃、150-200rpm培養12至36小時，制備得到釀酒酵母種子液；