[發明專利]一種多肽中測定N,N-二異丙基碳二亞胺含量的氣相分析方法

有效

• 申請號: 202110373055.7
• 申請日: 2021-04-07
• 公開（公告）號: CN113092646B
• 公開（公告）日: 2023-07-14
• 發明（設計）人: 王平;凌振宏;柴洪帆;吳春暖;朱云貴
• 申請（專利權）人: 海南中和藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/30
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所(普通合伙) 11130
• 代理人: 王為;李旭

1.一種多肽中測定N,N-二異丙基碳二亞胺含量的氣相分析方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)取N,N-二異丙基碳二酰亞胺適量，用有機溶劑和混合溶劑稀釋至一定濃度，作為對照品貯備液；取待測胸腺法新樣品，加入堿性溶劑使其溶解后，再加入適量對照品貯備液，混勻并用混合溶劑稀釋至一定濃度，作為對照品溶液；

2)取待測胸腺法新樣品適量，加入堿性溶劑使其溶解后，再用混合溶劑進行稀釋，作為供試品溶液；

3)采用氣相色譜法對上述溶液進行檢測，其中氣相色譜條件為：

色譜柱：100％二甲基聚硅氧烷為固定相的色譜柱；

色譜柱升溫程序：起始柱溫為40℃；保持時間為2分鐘；以5℃/min的升溫速率升至80℃，維持3分鐘；再以5℃/min的升溫速率升至120℃，維持3分鐘；再以10℃/min的升溫速率升至180℃，維持7分鐘；再以10℃/min的升溫速率升至240℃，維持17分鐘；

柱流量為1ml/min；

載氣為高純度氮氣或氦氣；

分流進樣的分流比為1∶1～15∶1；

4)按標準加入法計算被測樣品中N,N-二異丙基碳二亞胺的含量；

其中，所述堿性溶劑為氫氧化鈉溶液，濃度為0.5％～1.0％；所述有機溶劑選自甲醇、乙醇或它們任意混合的溶液，所述混合溶劑選自水與甲醇、水與乙醇或水與甲醇和乙醇它們任意混合的溶液。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述堿性溶劑為1.0％的氫氧化鈉溶液；所述混合溶劑為90％的甲醇水溶液。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟3)中分流進樣的分流比為5∶1。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟3)中的氣相色譜儀的進樣口溫度為150℃～300℃；檢測器溫度為150℃～350℃，進樣體積1μl～10μl。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，色譜儀的進樣口溫度為250℃；檢測器溫度為250℃；進樣體積為1μl。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟1)中的待測胸腺法新樣品溶液中胸腺法新的濃度為10mg/ml～300mg/ml。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，待測胸腺法新樣品溶液中胸腺法新的濃度為20mg/ml。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述對照品貯備液濃度為10μg/ml～1500μg/ml。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，對照品貯備液濃度為20μg/ml。

10.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)、精密稱取N,N-二異丙基碳二酰亞胺200mg，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加90％甲醇稀釋至刻度，作為對照品貯備液，精密稱取胸腺法新約200mg，置10ml量瓶中，加入1％氫氧化鈉溶液2ml溶解，再加對照品貯備液2ml，混勻，用90％甲醇稀釋至刻度，作為對照品溶液；

2)、精密稱取胸腺法新約200mg，置10ml量瓶中，加入1％氫氧化鈉溶液2ml溶解，用90％甲醇稀釋至刻度，作為供試品溶液；

3)、采用氣相色譜法對上述溶液進行檢測，其中氣相色譜條件為：

色譜柱：100％二甲基聚硅氧烷毛細管柱DB-1，型號30m×0.53mm×5μm；流速：1ml/min，分流比：5:1，進樣體積：1μl；進樣口溫度：250℃；檢測器溫度：250℃；

色譜柱升溫程序，起始柱溫為40℃；保持時間為2分鐘；以5℃/min的升溫速率升至80℃，維持3分鐘；再以5℃/min的升溫速率升至120℃，維持3分鐘；再以10℃/min的升溫速率升至180℃，維持7分鐘；再以10℃/min的升溫速率升至240℃，維持17分鐘；

4)按標準加入法計算被測樣品中N,N-二異丙基碳二亞胺的含量。