[發(fā)明專利]一種眼鏡蛇毒注射用NGF的制備方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110372927.8 | 申請日： | 2021-04-07 |
| 公開（公告）號： | CN113416242A | 公開（公告）日： | 2021-09-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 白育林;袁樹成 | 申請（專利權(quán)）人： | 云南龍鳳谷生物藥業(yè)有限公司;白育林 |
| 主分類號： | C07K14/48 | 分類號： | C07K14/48;C07K1/16;C07K1/14 |
| 代理公司： | 北京智橋聯(lián)合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11560 | 代理人： | 張衛(wèi)武 |
| 地址： | 650118 云南省昆明市*** | 國省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 眼鏡 蛇毒 注射 ngf 制備 方法 | ||
1.一種眼鏡蛇毒注射用NGF的制備方法，包括：
將眼鏡蛇粗毒進(jìn)行兩次凝膠層析，其中凝膠層析Ⅰ為SP-Sephadex G-25柱層析，凝膠層析Ⅱ為Acta Rosorse柱層析或Hplc Resours柱層析；在凝膠層析Ⅰ之前對加入緩沖液的蛇毒和凝膠層析Ⅰ后對于粗蛇毒神經(jīng)生長因子液進(jìn)行冷凍處理。
2.如權(quán)利要求1所述的眼鏡蛇毒注射用NGF的制備方法，其特征在于所述冷凍處理可以是選自常規(guī)冷凍、CAS冷凍、高壓冷凍、磁共振冷凍技術(shù)、微波輻射冷凍、超聲波冷凍、真空冷凍中的一種；優(yōu)選的，所述冷凍處理選自CAS冷凍、真空冷凍、超聲冷凍和微博輻射冷凍，更為優(yōu)選的所屬冷凍處理選自CAS冷凍、真空冷凍、超聲冷凍。
3.如權(quán)利要求2所述的眼鏡蛇毒注射用NGF的制備方法，其特征在于所述凝膠層析在低于25℃下進(jìn)行，更優(yōu)選的低于20℃，更加優(yōu)選的低于10℃。
4.如權(quán)利要求2所述的眼鏡蛇毒注射用NGF的制備方法，其特征在于所述凝膠層析過程中緩沖液的pH值優(yōu)選在5-8之間。
5.如權(quán)利要求2所述的眼鏡蛇毒注射用NGF的制備方法，其特征在于所述凝膠層析中的緩沖液可選自醋酸緩沖液，磷酸緩沖液，Tris緩沖液、MES緩沖液、Bis-Tris緩沖液、HEPES緩沖液、PIPES緩沖液、MOPS緩沖液、Tricine緩沖液、TEA緩沖液等中的一種。
6.如權(quán)利要求2所述的眼鏡蛇毒注射用NGF的制備方法，其特征在于所述凝膠層析的洗脫液采用Nacl溶液進(jìn)行洗脫，梯度為0-1M，流速為20-60m/h。
7.如權(quán)利要求2所述的眼鏡蛇毒注射用NGF的制備方法，其特征在于凝膠層析Ⅰ柱層析的柱比為5-25。
8.如權(quán)利要求2所述的眼鏡蛇毒注射用NGF的制備方法，其特征在于凝膠層析Ⅱ的柱比為20-45。
9.如權(quán)利要求1所述的眼鏡蛇毒注射用NGF的制備方法，其特征在于還包括預(yù)處理環(huán)節(jié)，所述預(yù)處理為將凍干蛇毒加入緩沖液中溶解制成0.1-1g/ml的蛇毒凍干粉溶液。
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