[發(fā)明專利]苦參組分的HPLC檢測(cè)方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110369922.X
• 申請(qǐng)日: 2021-03-29
• 公開（公告）號(hào): CN113125595A
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃玉英
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 黃玉英
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
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• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明屬于中醫(yī)中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種中藥苦參組分的HPLC檢測(cè)方法，包括(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(2)溶液制備(3)測(cè)定等步驟。本發(fā)明苦參組分的HPLC檢測(cè)方法，該方法操作簡單，檢測(cè)效率高，誤差小，重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)，檢驗(yàn)方法較穩(wěn)定，受影響的因素較少，適用性廣；該方法的專屬性、穩(wěn)定性、精密度、準(zhǔn)確度等均符合方法學(xué)驗(yàn)證要求，具有很強(qiáng)實(shí)用性，采用該方法對(duì)多家企業(yè)生產(chǎn)的苦參(中藥飲片)組分進(jìn)行檢測(cè)，能夠快速準(zhǔn)確的檢測(cè)出氧化苦參堿、氧化槐果堿、槐定堿、苦參堿、槐果堿的含量，可用于苦參中藥材及其飲片的檢驗(yàn)分析和品質(zhì)判定。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中醫(yī)中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種中藥苦參組分的HPLC檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

苦參為常用中藥材，是豆科植物苦參(Sophora flavescens Ait.)的干燥根，具有清熱燥濕、殺蟲、利尿的功效。臨床用于熱痢、便血、黃疸、尿閉、赤白帶下、陰腫陰癢、濕疹、皮膚瘙癢、疥癬麻風(fēng)，外治滴蟲性陰道炎。由于其治療效果顯著，目前在臨床上已被廣泛使用，其主要有效成分包括氧化苦參堿、氧化槐果堿、槐定堿、苦參堿和槐果堿等多種生物堿。

氧化苦參堿、氧化槐果堿、槐定堿、苦參堿和槐果堿是苦參的主要有效成分，苦參的現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中，《中國藥典》2020年版一部，不控制氧化槐果堿、槐定堿和槐果堿的含量，僅以氧化苦參堿和含量較小的苦參堿為質(zhì)控指標(biāo)，不盡合理。

本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足而提供的一種苦參組分的HPLC檢測(cè)方法，采用該方法對(duì)苦參中的多種生物堿組分進(jìn)行測(cè)定，操作簡單，檢測(cè)效率高，誤差小，重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)，檢驗(yàn)方法較穩(wěn)定，適用性廣，能有效的控制苦參的質(zhì)量。

發(fā)明內(nèi)容

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案：

一種苦參組分的HPLC檢測(cè)方法，包括以下步驟：

(1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，色譜柱：WatersT3 C18柱，4.6×250mm，5μm或等效柱，流動(dòng)相：乙腈(A)-0.1％磷酸溶液(三乙胺調(diào)pH值至8.0)(B)，梯度洗脫(程序見表1)。流速：1.0ml/min，檢測(cè)波長：208nm，柱溫：25℃，進(jìn)樣量：20μl，理論板數(shù)按槐定堿峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。

表1 梯度洗脫程序

(2)溶液制備：

供試品溶液制備：取本品粉末(過三號(hào)篩)約0.3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加濃氨試液0.5ml濕潤，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率320W，頻率40kHz)45分鐘，放冷，再稱定重量，用三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，回收溶劑至干，殘?jiān)右译?0.1％磷酸溶液(三乙胺調(diào)節(jié)pH值至8.0)(11∶89)適量使溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加乙腈-0.1％磷酸溶液(三乙胺調(diào)節(jié)pH值至8.0)(11∶89)至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，5000轉(zhuǎn)/min離心5min后用0.45μm的濾膜過濾，即得供試品溶液。

對(duì)照品溶液的制備：精密稱取氧化苦參堿對(duì)照品、氧化槐果堿對(duì)照品、槐定堿對(duì)照品、苦參堿對(duì)照品和槐果堿對(duì)照品適量，用乙腈-0.1％磷酸溶液(三乙胺調(diào)節(jié)pH值至8.0)(11∶89)定量稀釋制成每1ml含氧化苦參堿150μg、氧化槐果堿100μg、槐定堿75μg、苦參堿10μg、槐果堿10μg的混合溶液，即得。

(3)測(cè)定：

分別精密量取供試品溶液和對(duì)照品溶液各20μl，注入液相色譜儀，照上述色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖。供試品溶液中各組分的含量用對(duì)照品溶液以外標(biāo)法計(jì)算。

上述的苦參組分的HPLC檢測(cè)方法，所述的檢測(cè)器為紫外-可見分光檢測(cè)器。

所述的苦參組分的HPLC檢測(cè)方法，用HPLC法檢測(cè)苦參組分，將氧化苦參堿、氧化槐果堿、槐定堿、苦參堿和槐果堿分離，可單獨(dú)測(cè)定這五個(gè)組分的含量。