[發明專利]苦參組分的HPLC檢測方法

在審

• 申請號: 202110369922.X
• 申請日: 2021-03-29
• 公開（公告）號: CN113125595A
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發明（設計）人: 黃玉英
• 申請（專利權）人: 黃玉英
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.苦參組分的HPLC檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)色譜條件與系統適用性試驗：

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，色譜柱：WatersT3 C18柱，4.6×250mm，5μm或等效柱，流動相：乙腈(A)-0.1％磷酸溶液(三乙胺調pH值至8.0)(B)，梯度洗脫(程序見表1)。流速：1.0ml/min，檢測波長：208nm，柱溫：25℃，進樣量：20μl，理論板數按槐定堿峰計算應不低于5000。

表1梯度洗脫程序

(2)溶液制備：

①供試品溶液制備：取本品粉末(過三號篩)約0.3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加濃氨試液0.5ml濕潤，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率320W，頻率40kHz)45分鐘，放冷，再稱定重量，用三氯甲烷補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液10ml，回收溶劑至干，殘渣加乙腈-0.1％磷酸溶液(三乙胺調節pH值至8.0)(11：89)適量使溶解，轉移至10ml量瓶中，加乙腈-0.1％磷酸溶液(三乙胺調節pH值至8.0)(11：89)至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，5000轉/min離心5min后用0.45μm的濾膜過濾，即得供試品溶液。

②對照品溶液的制備：精密稱取氧化苦參堿對照品、氧化槐果堿對照品、槐定堿對照品、苦參堿對照品和槐果堿對照品適量，用乙腈-0.1％磷酸溶液(三乙胺調節pH值至8.0)(11：89)定量稀釋制成每1ml含氧化苦參堿150μg、氧化槐果堿100μg、槐定堿75μg、苦參堿10μg、槐果堿10μg的混合溶液，即得。

(3)測定：

分別精密量取供試品溶液和對照品溶液各20μl，注入液相色譜儀，照上述色譜條件測定，記錄色譜圖。供試品溶液中各組分的含量用對照品溶液以外標法計算。

2.權利要求1所述的苦參組分的HPLC檢測方法，其特征在于，所述的檢測器為紫外-可見分光檢測器。

3.權利要求1所述的苦參組分的HPLC檢測方法，其特征在于，用HPLC法將氧化苦參堿、氧化槐果堿、槐定堿、苦參堿和槐果堿分離，可單獨測定這五個組分的含量。