[發明專利]檢測CD8+聯合CD163+免疫細胞在腫瘤組織中分布的方法

在審

• 申請號: 202110369287.5
• 申請日: 2021-04-06
• 公開（公告）號: CN113092762A
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 張道全
• 申請（專利權）人: 張道全
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 北京八月瓜知識產權代理有限公司 11543
• 代理人: 李斌

本發明公開了檢測CD8+聯合CD163+免疫細胞在腫瘤組織中分布的方法，本發明能明確CD8⁺及CD163⁺免疫細胞在乳腺癌腫瘤中心及腫瘤侵襲邊緣分布表達情況；確定CD8⁺及CD163⁺免疫細胞在TC、IM分布表達與臨床病理指標的相關系；明了乳腺癌微環境中CD8⁺、CD163⁺免疫細胞組織分布表達與患者DFS及OS的相關性；明晰CD8⁺聯合CD163⁺在TC+IM中表達分布作為乳腺癌預后判斷標志物的可行性，本發明具有臨床實用性，TILs在乳腺癌中可作為患者預后判斷標志物已被廣泛認可，但其轉化到臨床應用中仍有諸多問題。本課題，從新近研究CD8⁺、CD163⁺免疫細胞入手，從免疫細胞組織定位及表達兩方面分析，采用聯合使用的方式評價CD8⁺、CD163⁺作用預后標志物的可行性，實驗設計縝密，實驗操作簡單，統計邏輯嚴謹。

技術領域

本發明涉及一種癌癥檢測技術領域，具體是檢測CD8+聯合CD163+免疫細胞在腫瘤組織中分布的方法。

背景技術

乳腺癌是女性最常見惡性腫瘤之一，位于美國女性腫瘤發病率的第一位，致死率第二位。據我國腫瘤登記中心數據分析預測，2015年我國女性新發乳腺癌患者28.6萬、死亡6.9萬位于女性腫瘤發病率的首位及死亡率第六位。當前乳腺癌的系統治療雖可促進患者生存期，但治療效果在相同臨床病理分期患者中具有巨大差異。因此，亟待尋求新的預后判斷標志物對乳腺癌診治效果進行評估。機體的免疫系統對腫瘤具有重要的免疫監視作用，免疫系統的強弱與癌細胞淋巴結轉移、復發及預后密切關聯。腫瘤免疫學領域的近期研究顯示，腫瘤組織中的腫瘤浸潤淋巴細胞(tumor-infliltrating lymphocytes,TILs)與患者的生存期密切相關，可潛在用于腫瘤的預后判斷。

腫瘤浸潤淋巴細胞是腫瘤細胞免疫的重要組成部分，CD8⁺T細胞(Cytotoxic Tcell，CTL)作為腫瘤細胞免疫的重要組成在細胞介導的抗腫瘤免疫中不可或缺。研究顯示，CD8⁺T細胞在乳腺癌腫瘤微環境中的表達與腫瘤患者良好的預后密切相關。但CD8⁺免疫細胞除了在T細胞表面表達外，其在部分NK細胞及小部分iNKT細胞中均有表達，然而目前未有關于CD8⁺TILs在腫瘤中的表達及作用的研究。CD163是一種在吞噬細胞上特異表達的血紅蛋白清道夫受體，可作為M2巨噬細胞活化的標志物。M2巨噬細胞具有促進腫瘤發展的作用，其在免疫抑制、細胞增殖、血管生成、上皮細胞間質轉化等過程中發揮重要影響。研究顯示，CD163也可在某些腫瘤細胞中表達，此類細胞為腫瘤細胞與巨噬細胞的融合細胞。近年，在黑色素瘤及乳腺癌中的研究表明，腫瘤組織CD163⁺M2吞噬細胞的表達與患者預后密切相關。Catharina等在乳腺癌中發現相較于腫瘤瘤巢，腫瘤基質中的CD163⁺細胞的表達與患者預后相關性更強。因此，免疫細胞在腫瘤不同部位的浸潤可用來評估患者的預后情況。近年來，乳腺癌中的研究普遍認為TILs對患者預后評價具有巨大的潛在價值，但目前TILs表達及分布作為預后判斷標志物仍有諸多問題阻遏其的發展及應用，這些問題主要包括，采用何種免疫細胞，免疫細胞在腫瘤組織中的分布與預后評價的關系，是否單獨使用一種或聯合多種TILs作為預后判斷物？

綜上，乳腺癌患者在荷瘤負荷狀態下CD8+免疫細胞、CD163+免疫細胞的分布表達與患者預后密切相關，但CD8+免疫細胞、CD163+免疫細胞作為潛在預后判斷標志物仍存在諸多問題需要探究。而目前罕有關于CD8+、CD163+免疫細胞在乳腺癌腫瘤組分布與患者預后相關性的研究，本方法重點研究原發浸潤性乳腺癌中CD8+、CD163+、CD8+聯合CD163+免疫細胞的分布表達差異作為腫瘤預后判斷標志物的可行性，對判斷預后具有重要的意義。