[發明專利]檢測CD8+聯合CD163+免疫細胞在腫瘤組織中分布的方法

在審

• 申請號: 202110369287.5
• 申請日: 2021-04-06
• 公開（公告）號: CN113092762A
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 張道全
• 申請（專利權）人: 張道全
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 北京八月瓜知識產權代理有限公司 11543
• 代理人: 李斌

1.檢測CD8+聯合CD163+免疫細胞在腫瘤組織中分布的方法，其特征在于：方法步驟如下：

步驟一：收集原發浸潤性乳腺癌患者組織樣本，收集100例原發浸潤性乳腺癌組織蠟塊標本，并收集患者病理信息；

入組標準：①選擇一年內于同一醫院收治的原發浸潤性乳腺癌患者。②入選患者符合我國發布的《CSCO乳腺癌診療指南2017》診斷標準，確診為原發浸潤性乳腺癌。③患者為原發浸潤性乳腺癌，且在術前未接受放療、化療及內分泌治療等。④患者無免疫性疾病及慢性感染病史。⑤所有患者均簽訂知情同意書，符合醫學倫理學規定；

選取腫瘤組織標準：腫瘤組織需避開壞死和出血區域；

石蠟標本處理：組織離體后放入4％多聚甲醛4℃過夜進行固定，經過酒精脫水及二甲苯透明之后浸臘后包埋，進行長期保存。

步驟二：研究CD8⁺及CD163⁺免疫細胞在原發浸潤性乳腺癌中TC及IM的表達分布以患者原發浸潤性乳腺癌石蠟標本為材料，采用免疫組化的方式檢測CD8⁺及CD163⁺免疫細胞在乳腺癌TC及IM中的分布及表達數量高低；

由兩位資深病理科醫生在雙盲的狀態下進行讀片，取平均值。

步驟三：統計分析CD8⁺、CD163⁺免疫細胞在TC及IM表達分布與患者臨床病理指標的相關性，依據乳腺癌分期、腫瘤大小、TNM分期、免疫組化分型、淋巴結轉移進行分組，在各組間再根據病理特征分層高低程度二次分組，統計TC、IM中CD8⁺、CD163⁺免疫細胞的表達情況，分析CD8⁺及CD163⁺免疫細胞在TC、IM的表達與上述臨床病理學指標分層的相關性。

步驟四：分析TC+IM中CD8⁺或CD163⁺細胞在乳腺癌中的分布表達與患者生存期的關系，以TC+IM中CD8⁺或CD163⁺細胞的表達高低進行分組，統計分析TC+IM中CD8⁺、CD163⁺細胞表達狀況與患者DFS、OS的相關性。并在此基礎上得出CD8⁺聯合CD163⁺在TC+IM表達分布情況與DFS、OS進展相關的最佳組合(FCIS)及最差組合(UCIS)。

步驟五：分析CD8⁺聯合CD163⁺細胞在乳腺癌中的表達分布與患者生存期的關系，統計分析FCIS、UCIS及其他CD8⁺聯合CD163⁺細胞在TC+IM中分布表達組合與患者DFS、OS的相關性。