[發明專利]檢測甲狀腺球蛋白的免疫膠體金試紙條及其制備方法

在審

• 申請號: 202110367758.9
• 申請日: 2017-04-28
• 公開（公告）號: CN113092751A
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 何向輝;王義增
• 申請（專利權）人: 天津醫科大學總醫院
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/544
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司 11385
• 代理人: 李正

本發明公開了檢測甲狀腺球蛋白的免疫膠體金試紙條在制備術中現場快速檢測可疑淋巴結的甲狀腺球蛋白值的工具中的應用，涉及免疫測定法技術領域。本發明所述應用中，免疫膠體金試紙條包括依次部分疊接在PVC底板上的樣品墊、金標墊、硝酸纖維素膜、吸水墊，所述金標墊包被有膠體金標記的一種抗甲狀腺球蛋白抗體，所述硝酸纖維素膜上設有分隔的檢測線和質控線，檢測線包被另一種抗甲狀腺球蛋白抗體，質控線上包被羊抗鼠IgG。本發明還提供了所述免疫膠體金試紙條在制備輔助診斷甲狀腺乳頭狀癌的淋巴結轉移的工具中的應用，和在制備檢測淋巴結細針穿刺抽吸洗脫液中甲狀腺球蛋白值的工具中的應用。

本申請為申請日為2017.04.28、申請號為201710290582.5、申請名稱為“檢測甲狀腺球蛋白的免疫膠體金試紙條及其制備方法”的發明專利申請的分案申請，申請人為天津醫科大學總醫院。

技術領域

本發明涉及免疫測定法，具體是一種檢測甲狀腺球蛋白的免疫膠體金試紙條及其制備方法。

背景技術

甲狀腺球蛋白(Thyroglobulin，Tg)是甲狀腺濾泡上皮分泌的一種分子量約660000的糖蛋白，是合成甲狀腺激素的基本原料之一。血Tg水平測定及淋巴結細針穿刺抽吸洗脫液Tg水平(FNA-Tg)在分化型甲狀腺癌特別是甲狀腺乳頭狀癌的診治、隨訪中應用廣泛。術前血Tg水平升高提示術后的血Tg水平可作為較為敏感的腫瘤檢測指標。另外，無論是促甲狀腺激素抑制還是非促甲狀腺激素抑制狀態下的術后血清Tg水平，都有助于術后甲狀腺乳頭狀癌的持續狀態、甲狀腺組織的殘留情況的評估，并有助于預測復發可能。血Tg水平還可能是碘缺乏的一個指標。術前及術后隨訪的淋巴結細針穿刺抽吸洗脫液測Tg水平(FNA-Tg)可輔助用于可疑頸部淋巴結甲狀腺乳頭狀癌轉移的診斷，具有較高的靈敏度及特異度。

數十年來，甲狀腺癌的發病率全世界范圍內逐年升高，其中屬分化型甲狀腺癌的甲狀腺乳頭狀癌約占總數的70-90％。且近年來甲狀腺微小乳頭狀癌發病率明顯升高。而關于甲狀腺癌手術患者是否須同時行部分淋巴結清掃的爭議也日益凸顯。目前治療性頸淋巴結清掃而非預防性頸淋巴結清掃被強調。但目前術前影像學檢查對最容易且最常見轉移的區域淋巴結(約為30％-80％)，特別是頸部中央區淋巴結，診斷能力有限(文獻報道約占20％-30％)。因此，能否術中診斷淋巴結轉移對于避免過度治療或治療不足十分重要。術中冰凍常用于術中可疑轉移淋巴結的診斷，需取下可疑轉移淋巴結送檢，但仍有漏診存在。如能術中快速檢測可疑轉移淋巴結甲狀腺球蛋白輔助頸部淋巴結轉移的診斷，則可一定程度上解決上述問題。

目前臨床上常用的檢測Tg的方法有放射免疫分析法、化學發光免疫分析法與電化學發光免疫分析法。以上方法中放射免疫分析法檢測精確度低，檢測時間長、有放射性污染、批內變異系數大、不能實現自動化；化學發光免疫分析法及電化學發光免疫分析法檢測時間較短、靈敏度高、穩定性好，但設備及配套的試劑費用相對昂貴。由于設備或費用或技術缺陷的原因，上述檢測方法不適合現場檢測。

發明內容

有鑒于此，本發明為了解決現有的Tg檢測方法不適合現場快速檢測的問題，所提出的一種檢測甲狀腺球蛋白的免疫膠體金試紙條及其制備方法。膠體金免疫層析技術是以免疫層析為基礎建立的免疫標記技術，其特點是以膠體金為顯色標記物與抗原、抗體特異性反應相結合。該檢測方法結果判讀簡單，檢測時間短，特異性強，便攜、經濟實用，適合現場檢測。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了一種檢測甲狀腺球蛋白的免疫膠體金試紙條，包括依次部分疊接在PVC底板上的樣品墊、金標墊、硝酸纖維素膜、吸水墊，所述金標墊包被有膠體金標記的一種抗甲狀腺球蛋白抗體，所述硝酸纖維素膜上設有分隔的檢測線和質控線，檢測線包被另一種抗甲狀腺球蛋白抗體，質控線上包被羊抗鼠IgG。

本發明還提供了一種上述檢測甲狀腺球蛋白的免疫膠體金試紙條的制備方法，包括以下步驟：