[發(fā)明專利]一種真菌菌種保存方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110366715.9
• 申請日: 2021-04-06
• 公開（公告）號: CN112899166B
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 尹良芬
• 申請（專利權(quán)）人: 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N1/04
• 分類號: C12N1/04
• 代理公司: 上海德悅知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31344
• 代理人: 董黨紅

1.一種真菌菌種保存方法，其特征在于：將干熱滅菌的變色硅膠顆粒和干燥的長滿真菌菌絲和/或真菌孢子的小濾紙片放入透明或半透明的無菌微量離心管或無菌指形管中，微量離心管或指形管使用PARAFILM封口膜封口，存放在透明或半透明的微量離心管冷凍盒中，放置于﹣20℃冰箱保存；所述變色硅膠顆粒的滅菌條件為160℃干熱滅菌2小時；所述長滿真菌菌絲和/或真菌孢子的小濾紙片的干燥條件為，在底部盛有干燥硅膠的干燥器中室溫干燥5天，所述干燥器中的干燥硅膠的干燥條件為80℃干燥2小時。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的真菌菌種保存方法，其特征在于：所述微量離心管為尖底微量離心管或圓底微量離心管。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的真菌菌種保存方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)在無菌環(huán)境中，將真菌菌種移植到無菌固體培養(yǎng)基上，在移植點周圍放置數(shù)片無菌小濾紙片；

2)培養(yǎng)，直至真菌菌絲和/或真菌孢子長滿小濾紙片；

3)在無菌環(huán)境中，將長滿真菌菌絲和/或真菌孢子的小濾紙片取出放在無菌培養(yǎng)皿中；

4)將步驟3)中的培養(yǎng)皿放在底部盛有干燥硅膠的干燥器中室溫干燥5天，其中，所述干燥器中的干燥硅膠的干燥條件為80℃干燥2小時；

5)在無菌環(huán)境中，將干熱滅菌并冷卻后的無菌變色硅膠顆粒放入透明或半透明的無菌微量離心管或無菌指形管中，再將干燥的長滿真菌菌絲和/或真菌孢子的小濾紙片放入微量離心管或指形管中，用PARAFILM封口膜將微量離心管或指形管封口，其中，所述變色硅膠顆粒的滅菌條件為160℃干熱滅菌2小時；

6)將步驟5)中的微量離心管或指形管放入透明或半透明的微量離心管冷凍盒內(nèi)，將冷凍盒放置于﹣20℃冰箱保存。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的真菌菌種保存方法，其特征在于：步驟1)所述的固體培養(yǎng)基為馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，具體為，取馬鈴薯200g的煮沸濾液加蒸餾水定容至1000ml，加入葡萄糖20g、瓊脂20g，121℃濕熱滅菌15min。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的真菌菌種保存方法，其特征在于：步驟2)所述的培養(yǎng)的條件為，在恒溫培養(yǎng)箱25℃黑暗培養(yǎng)。