[發(fā)明專利]一種植物乳桿菌及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110362228.5
• 申請(qǐng)日: 2021-04-02
• 公開（公告）號(hào): CN112877262B
• 公開（公告）日: 2021-10-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 賈長(zhǎng)生;汪智婷;王信超;李珮銣
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天益健康科學(xué)研究院（鎮(zhèn)江）有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12N1/04;C12N11/10;A23L33/135;A23C9/123;A61K35/747;A61P31/04;C12R1/25
• 代理公司: 南京中律知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32341
• 代理人: 沈振濤

1.一種植物乳桿菌，其特征在于，命名為植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）NKK20，該菌株已于2020年10月19日保藏在中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCCNO：M2020596，保藏地址為中華人民共和國(guó)湖北省武漢市武漢大學(xué)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的植物乳桿菌菌株，其特征在于，所述菌株能夠耐酸、耐膽鹽，代謝生成乙酸、丙酸、異丁酸、丁酸、異戊酸、戊酸，該菌株能夠粘附腸粘膜，抑制金黃色葡萄球菌和腸炎沙門氏菌生長(zhǎng)。

3.一種菌劑，其特征在于，活性成分中含有權(quán)利要求1-2中任一項(xiàng)所述的植物乳桿菌菌株。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的菌劑，其特征在于，該菌劑在發(fā)酵冷凍干燥制備過(guò)程中，添加有冷凍干燥保護(hù)劑，冷凍干燥保護(hù)劑成分為：水60%-80%，脫脂乳粉6%-14%，蔗糖2%-8%，甘露糖醇4%-7%，吐溫-80 1%-2.5%，甜菜堿1%-3%，谷氨酸鈉0.5%-1.2%，可溶性淀粉2%-8%。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的菌劑，其特征在于，冷凍干燥保護(hù)劑成分為：水70%，脫脂乳粉10%，蔗糖5%，甘露糖醇5%，吐溫-80 2%，甜菜堿2%，谷氨酸鈉1%，可溶性淀粉5%。

6.根據(jù)權(quán)利要求4-5中任一項(xiàng)所述的菌劑，其特征在于，菌劑在制備過(guò)程中經(jīng)5%-10%殼聚糖溶液與4%-10%海藻酸鈉溶液進(jìn)行包埋保護(hù)。

7.一種組合物，其特征在于，成分中含有權(quán)利要求3-6中任一項(xiàng)所述的菌劑。

8.一種如權(quán)利要求7所述的組合物在制備食品、健康營(yíng)養(yǎng)品或酸奶發(fā)酵劑中的應(yīng)用。

9.一種如權(quán)利要求7所述的組合物在制備抑制胃腸道致病菌的藥物中的應(yīng)用。

10.一種植物乳桿菌的凍干粉的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）發(fā)酵培養(yǎng)：

將權(quán)利要求1所述的植物乳桿菌NKK20按3%-15%接種量接種于高產(chǎn)培養(yǎng)基中，36℃-39℃發(fā)酵培養(yǎng)16-20h；活菌量達(dá)到108CFU/ml-1010CFU/ml時(shí)，將發(fā)酵液降溫至20℃以下，離心，收獲菌泥；

其中，高產(chǎn)培養(yǎng)基為水溶液，含有：大豆蛋白胨6-10g/L，酵母浸粉3-8g/L，無(wú)水葡萄糖15-28g/L，乙酸鈉3-6g/L，大豆卵磷脂3g/L-10g/L，磷酸氫二鉀1.8-2.2g/L，檸檬酸氫二銨1.5-2.5g/L，硫酸鎂0.1-0.3g/L，硫酸錳0.02-0.06g/L，吐溫-80 0.5-2.0ml/L，L-半胱氨酸鹽酸鹽0.05-0.25g/L，pH值5.5-6.5；

（2）保護(hù)劑乳化：

將收獲的菌泥稀釋至含水量60%-80%，等體積加入菌泥保護(hù)劑進(jìn)行乳化；

其中，菌泥保護(hù)劑成分為：水70%，脫脂乳粉10%，蔗糖5%，甘露糖醇5%，吐溫-80 2%，甜菜堿2%，谷氨酸鈉1%，可溶性淀粉5%；

（3）菌體包埋保護(hù)：

乳化液中加入殼聚糖溶液，攪拌均勻，攪拌時(shí)間為1-2min，攪拌轉(zhuǎn)速為100-120rpm；再加入與殼聚糖溶液等體積的海藻酸鈉溶液，繼續(xù)攪拌，攪拌時(shí)間為1-2min，攪拌轉(zhuǎn)速為60-70rpm；

其中，乳化液：殼聚糖溶液的體積比為4:1；殼聚糖溶液濃度為5%-10%；海藻酸鈉溶液濃度為4%-10%；

（4）真空冷凍干燥，即得植物乳桿菌NKK20凍干粉。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的一種植物乳桿菌的凍干粉的制備方法，其特征在于：步驟（3）中，殼聚糖溶液濃度為7.0%；海藻酸鈉溶液濃度為6.5%。