[發(fā)明專(zhuān)利]一種用生物反應(yīng)裝置培養(yǎng)人參不定根的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110361903.2
• 申請(qǐng)日: 2021-04-02
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112806267B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-08-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張明臣;劉冰;閆培生;高秀君
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山東安然納米實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 分類(lèi)號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 北京元中知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11223
• 代理人: 盧雪梅

本發(fā)明公開(kāi)了一種用生物反應(yīng)裝置培養(yǎng)人參不定根的方法，包括：(1)將成熟人參清洗消毒，切片，接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)出人參不定根；將(1)獲得的人參不定根再次接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，暗培養(yǎng)；將(2)獲得的人參不定根接種到液體培養(yǎng)基中，100?140rpm搖床，暗培養(yǎng)；將(3)獲得的人參不定根接種含有液體培養(yǎng)基的生物反應(yīng)裝置，暗培養(yǎng)，獲得人參不定根；所述的液體培養(yǎng)基包括：10?55g/L蔗糖，0.8?1.5g/L WPM培養(yǎng)基，0.6?1.6g/L N6培養(yǎng)基，1?6mg/L萘乙酸，0.2?1.2mg/L激動(dòng)素和0?1.8mg/L吲哚丁酸。本發(fā)明的方法從成熟人參直接誘導(dǎo)產(chǎn)生不定根，可以簡(jiǎn)化誘導(dǎo)步驟、縮短誘導(dǎo)時(shí)間，采用改進(jìn)的液體培養(yǎng)基，配合生物反應(yīng)裝置及控制工藝，獲得的不定根的增長(zhǎng)倍數(shù)高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體地說(shuō)，涉及一種用生物反應(yīng)裝置培養(yǎng)人參不定根的方法。

背景技術(shù)

人參(Panax ginseng C.A.Mey.)是五加科人參屬植物，分布于中國(guó)、日本、韓國(guó)，其根莖是名貴的中藥材，號(hào)稱(chēng)“百草之王”。人參味甘、微苦，微溫，具有大補(bǔ)元?dú)猓瑥?fù)脈固脫，補(bǔ)脾益肺，生津養(yǎng)血，安神益智等功效，多用于體恤欲脫，脾虛食少，肺虛喘咳，津傷口渴，驚悸失眠等。人參皂苷是人參主要的活性成分，有抗疲勞、延緩衰老、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、提高機(jī)體免疫力、改善心腦血管供血不足、抑制腫瘤細(xì)胞生產(chǎn)等功效。近年來(lái)，人參被廣泛地用在各類(lèi)化妝品、保健品、飲品中，人參的市場(chǎng)前景非常廣闊。

目前由于過(guò)度采挖、環(huán)境破壞等，野生人參資源幾乎滅絕，大田栽培是人參的主要來(lái)源。然而人參生長(zhǎng)緩慢，種植年限長(zhǎng)，對(duì)環(huán)境條件要求嚴(yán)格，其品質(zhì)易受氣候、栽培條件及病蟲(chóng)害的影響，栽培技術(shù)復(fù)雜以及農(nóng)殘超標(biāo)、老參地等問(wèn)題也極大地限制了人工栽培人參的發(fā)展前景。大田栽培人參供應(yīng)難以滿(mǎn)足市場(chǎng)的需求。人參組織培養(yǎng)技術(shù)周期短，不受季節(jié)限制，容易進(jìn)行大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)，具有很大的發(fā)展前景。

目前不定根一般是由人參愈傷組織誘導(dǎo)產(chǎn)生的，需要先誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，再誘導(dǎo)產(chǎn)生不定根，所需的實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)，操作步驟復(fù)雜，污染風(fēng)險(xiǎn)較高的問(wèn)題。另外，培養(yǎng)的人參中還存在人參皂苷含量低，難以滿(mǎn)足應(yīng)用需求的問(wèn)題。

申請(qǐng)?zhí)枮镃N201711459037.0的中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)了一種野人參不定根組織培養(yǎng)的方法，包括如下步驟：(1)野人參愈傷組織的誘導(dǎo)；(2)野人參愈傷組織的增殖；(3)野人參不定根的誘導(dǎo)；(4)液體培養(yǎng)基中野人參不定根增殖。上述技術(shù)方案中，需要先誘導(dǎo)愈傷組織，再誘導(dǎo)不定根，所需要的周期長(zhǎng)，過(guò)程復(fù)雜，且人參皂苷的含量也不高。

申請(qǐng)?zhí)枮?01410698528.0的中國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)了一種人參不定根誘導(dǎo)增殖方法，包括以下步驟：將人參組培苗切割成組織小塊后接種于固體誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)形成不定根，將所述不定根切割成不定根小塊后接種于液體增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行不定根的增殖培養(yǎng)；其中，所述固體誘導(dǎo)培養(yǎng)基和液體增殖培養(yǎng)基為以1/2MS(-N)培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基含有濃度為1-10mg/L的吲哚丁酸。上述方案中，將日齡為28-32天的組培苗切成小塊直接誘導(dǎo)不定根，組培苗幼嫩，分化能力強(qiáng)，且實(shí)際上需要先經(jīng)過(guò)種子萌發(fā)或者外植體培養(yǎng)獲得組培苗，仍然需要至少28-32天的時(shí)間，外植體培養(yǎng)仍然需要誘導(dǎo)愈傷組織，且實(shí)際上并沒(méi)有縮短周期。因此，倘若探索獲得一種能夠從成熟人參直接誘導(dǎo)產(chǎn)生不定根的方法，可以縮減誘導(dǎo)周期，簡(jiǎn)化誘導(dǎo)條件，再配合適宜的液體培養(yǎng)基和適宜的生物反應(yīng)器，能夠進(jìn)行快速擴(kuò)大生產(chǎn)，則具有廣泛的經(jīng)濟(jì)意義。

有鑒于此特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種用生物反應(yīng)裝置培養(yǎng)人參不定根培養(yǎng)的方法。本發(fā)明的方法從成熟人參的各個(gè)部分采用一步法誘導(dǎo)產(chǎn)生不定根，不需要誘導(dǎo)愈傷組織的中間步驟，可以簡(jiǎn)化誘導(dǎo)步驟、縮短誘導(dǎo)時(shí)間；本發(fā)明的液體培養(yǎng)基成分相對(duì)簡(jiǎn)單，配合生物反應(yīng)裝置及控制工藝，獲得的不定根的增長(zhǎng)倍數(shù)高，同時(shí)人參皂苷含量高。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用技術(shù)方案的基本構(gòu)思是：