[發明專利]一種用生物反應裝置培養人參不定根的方法

有效

• 申請號: 202110361903.2
• 申請日: 2021-04-02
• 公開（公告）號: CN112806267B
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發明（設計）人: 張明臣;劉冰;閆培生;高秀君
• 申請（專利權）人: 山東安然納米實業發展有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京元中知識產權代理有限責任公司 11223
• 代理人: 盧雪梅

1.一種用生物反應裝置培養人參不定根的方法，其特征在于，包括：

(1)將成熟人參清洗消毒，切片，接種到誘導培養基中誘導出人參不定根；

(2)將獲得的人參不定根再次接種到誘導培養基中，暗培養；

(3)將(2)獲得的人參不定根接種到液體培養基中，100-140rpm搖床，暗培養；

(4)生物反應裝置培養：將(3)獲得的人參不定根接種含有液體培養基的生物反應裝置，暗培養，獲得人參不定根；

步驟(1)和步驟(2)中，所述誘導培養基的組成為1-6mg/L萘乙酸，0.2-1mg/L赤霉素，0.1-0.6mg/L激動素，0.075-1.5g/L檸檬酸，0.03-1g/L抗壞血酸，20-60g/L蔗糖，1-6g/L植物凝膠，1-4g/L B5培養基和1-2.4g/L WPM培養基；

步驟(3)和(4)中，液體培養基的組成為10-55g/L蔗糖，0.8-1.5g/L WPM培養基，0.6-1.6g/LN6培養基，1-6mg/L萘乙酸，0.2-1.2mg/L激動素和0-1.8mg/L吲哚丁酸。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(4)中，生物反應裝置的通氣量為0.1-0.45vvm。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，生物反應裝置的通氣量為0.22-0.32vvm。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(4)中，所述生物反應裝置包括罐體，罐體的底壁的高度由四周向中心逐漸降低，形成上大下小的倒錐形；出料口設置在中心最低的位置，所述進氣裝置圍繞出料口間隔均勻分布在由四周向中心逐漸降低的底壁上。

5.根據權利要求1-4任意一項所述的方法，其特征在于，液體培養基的組成為35g/L蔗糖，1.35g/L WPM培養基，1g/L N6培養基，1-5mg/L萘乙酸，0.2-1mg/L激動素，0.2-1.8mg/L吲哚丁酸。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述的液體培養基的組成為35g/L蔗糖，1.35g/L WPM培養基，1g/L N6培養基，5mg/L萘乙酸，1mg/L激動素，0.2mg/L吲哚丁酸。

7.根據權利要求1-4任意一項所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，將不定根接種到液體培養基中，接種的不定根的質量占液體培養基體積的0.5％-3.0％。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，接種的不定根的質量占液體培養基體積的0.9％-1.8％。

9.根據權利要求1-4任意一項所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，滅菌的液體培養基的體積占生物反應裝置容積的30％-80％。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，滅菌的液體培養基的體積占生物反應裝置容積的45％-70％。

11.根據權利要求1-4任意一項所述的方法，其特征在于，步驟(1)和(2)中，22±1℃條件下暗培養4～5周，步驟(3)中，22±1℃條件下暗培養3～4周。

12.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述誘導培養基的組成為4mg/L萘乙酸，0.6mg/L赤霉素，0.4mg/L激動素，0.1g/L檸檬酸，0.05g/L抗壞血酸，30g/L蔗糖，3g/L植物凝膠，1.55g/L B5培養基和1.21g/L WPM培養基。

13.根據權利要求1-4任意一項所述的方法，其特征在于，所述人參選自野山參、移山參，林下參，園參。

14.根據權利要求13項所述的方法，其特征在于，所述人參為野山參。