[發明專利]一種汞離子的檢測方法

在審

• 申請號: 202110361644.3
• 申請日: 2021-04-02
• 公開（公告）號: CN113125397A
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發明（設計）人: 楊華林;周玉;張興平;徐明明;彭宇
• 申請（專利權）人: 長江大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 武漢智嘉聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 42231
• 代理人: 柏琳容

本發明涉及一種汞離子的檢測方法。該方法包括S1、采用所述共同激發波長激發SG I和NMM分別獲得兩者的發射峰520nm和615nm；S2、將不同已知濃度的Hg²⁺分別加入緩沖液中得到多組第一混合液；分別向每組所述第一混合液中添加NMM，SG I和KCl得到多組第二混合液；S3、得到每組所述第二混合液在發射峰520nm和615nm對應的熒光強度的比值R，得到Hg²⁺的濃度與熒光信號變化R/R₀的對應關系；S4、根據待測液的熒光光譜圖，結合所述Hg²⁺的濃度與熒光信號變化R/R₀的關系，得到所述待測液中Hg²⁺的濃度。該方法能夠實現精準又不受其他離子干擾，且檢測限低的檢測汞離子。

技術領域

本發明涉及汞離子濃度的檢測分析技術領域，尤其涉及一種汞離子的檢測方法。

背景技術

眾所周知，汞離子(Hg²⁺)是一種有毒重金屬離子。由于Hg²⁺與巰基具有較高的親和力，可以通過形成Hg-S鍵使一些關鍵酶和蛋白質失活，從而對人類健康造成嚴重損害，如引起耳聾、視力喪失和運動、認知障礙等。同時，Hg²⁺具有生物累積效應，可通過食物鏈在人體中富集。因此，即使在低濃度下，它也對人類健康有害。世界衛生組織(WHO)規定的飲用水中最高允許Hg²⁺含量為30nM。因此，開發一種簡單、靈敏、選擇性的Hg²⁺檢測方法是非常重要和迫切的。

傳統方法主要依靠原子吸收光譜法(AAS)、電感耦合等離子體質譜法(ICP-MS)、X射線熒光光譜法(R-FS)、冷蒸氣原子熒光光譜法(CVAF)和高效液相色譜法(HPLC)等，但這些方法通常需要昂貴的設備和專業的操作人員。寡核苷酸DNA生物傳感器由于成本低、穩定性高、易于修飾等優點，引起人們的廣發關注。然而，這類方法大多只依賴于單個熒光信號的變化(引起信號上升或下降)，通常會受到環境條件波動的影響，從而導致檢測的穩定性和可靠性較低。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是：如何實現精準又不受其他離子干擾，且檢測限低的檢測汞離子。

本發明提出一種汞離子的檢測方法，包括以下步驟：

S1、利用熒光分光光度計掃描SG I和NMM的激發光譜，獲得SG I和NMM的共同激發波長，采用所述共同激發波長激發SG I和NMM分別獲得兩者的發射峰520nm和615nm；

S2、將不同已知濃度的Hg²⁺分別加入至含有DNA序列P1和P2的緩沖液中得到多組第一混合液；分別向每組所述第一混合液中添加NMM，SG I和KCl得到多組第二混合液；其中，P1序列為：5’-AGGGTTTTGGGTTTTGGGTTTTGGGA-3’，P2序列為：5’-ACCCTTTTCCCTTTTCCCTTTTCCCT-3’；

S3、獲取每組所述第二混合液的熒光光譜圖，得到每組所述第二混合液在發射峰520nm和615nm對應的熒光強度的比值R，得到Hg²⁺的濃度與熒光信號變化R/R₀的對應關系；其中，R₀為Hg²⁺的濃度為0時，所述第二混合液在發射峰520nm和615nm處的熒光強度的比值；

S4、根據待測液的熒光光譜圖，結合所述Hg²⁺的濃度與熒光信號變化R/R₀的關系，得到所述待測液中Hg²⁺的濃度。

進一步地，得到所述待測液中Hg²⁺的濃度進一步包括：

S41、將所述待測液加入至含有DNA序列P1和P2的緩沖液中得到第三混合液；

S42、向所述第三混合液中添加NMM，SG I和KCl得到第四混合液；