[發明專利]一種汞離子的檢測方法

在審

• 申請號: 202110361644.3
• 申請日: 2021-04-02
• 公開（公告）號: CN113125397A
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發明（設計）人: 楊華林;周玉;張興平;徐明明;彭宇
• 申請（專利權）人: 長江大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 武漢智嘉聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 42231
• 代理人: 柏琳容

1.一種汞離子的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、獲取SG I和NMM的激發光譜，得到SG I和NMM的共同激發波長，采用所述共同激發波長激發SG I和NMM分別獲得兩者的發射峰520nm和615nm；

S2、將不同已知濃度的Hg²⁺分別加入至含有DNA序列P1和P2的緩沖液中得到多組第一混合液；分別向每組所述第一混合液中添加NMM，SG I和KCl得到多組第二混合液；其中，P1序列為：5’-AGGGTTTTGGGTTTTGGGTTTTGGGA-3’，P2序列為：5’-ACCCTTTTCCCTTTTCCCTTTTCCCT-3’；

S3、獲取每組所述第二混合液的熒光光譜圖，得到每組所述第二混合液在發射峰520nm和615nm對應的熒光強度的比值R，得到Hg²⁺的濃度與熒光信號變化R/R₀的對應關系；其中，R₀為Hg²⁺的濃度為0時，所述第二混合液在發射峰520nm和615nm處的熒光強度的比值；

S4、根據待測液的熒光光譜圖，結合所述Hg²⁺的濃度與熒光信號變化R/R₀的關系，得到所述待測液中Hg²⁺的濃度。

2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，得到所述待測液中Hg²⁺的濃度進一步包括：

S41、將所述待測液加入至含有DNA序列P1和P2的緩沖液中得到第三混合液；

S42、向所述第三混合液中添加NMM，SG I和KCl得到第四混合液；

S43、獲得待測液的熒光光譜圖，得到所述待測液在發射峰520nm和615nm處的熒光比值R₁，結合所述待測液的熒光信號變化R₁/R₀和所述Hg²⁺的濃度與熒光信號變化R/R₀的關系，得到所述待測液中Hg²⁺的濃度。

3.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，在步驟S3中，所述Hg²⁺的濃度與熒光信號變化R/R₀的關系為Y＝2.161X－0.3456，Y為R/R₀，X為Hg²⁺的濃度。

4.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，在步驟S1中，所述共同激發波長在380nm-400nm之間。

5.根據權利要求4所述的檢測方法，其特征在于，在步驟S1中，所述共同激發波長為395nm。

6.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，在步驟S3中，還包括用酶標儀來記錄發射峰520nm和615nm處的熒光信號的變化。

7.根據權利要求2所述的檢測方法，其特征在于，在步驟S41中，所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液，所述磷酸鹽緩沖液中，磷酸鹽的濃度為20mM，P1和P2的濃度為200nM。

8.根據權利要求2所述的檢測方法，其特征在于，在步驟S42中，添加7μM以上的NMM，添加3.92μM以上的SG I至所述第四混合液中。

9.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，在步驟S41中，將所述待測液加入至含有DNA序列P1和P2的緩沖液中，并在37℃下反應2-3h得到多組所述第三混合液。

10.根據權利要求2所述的檢測方法，其特征在于，在步驟S42中，向所述第三混合液中添加NMM，SG I和KCl，并在37℃下反應30min以上得到所述第四混合液。