[發明專利]對乙醇不敏感對正丁醇特異性響應的BmoR蛋白突變體

在審

• 申請號: 202110361553.X
• 申請日: 2021-04-02
• 公開（公告）號: CN115181168A
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發明（設計）人: 霍毅欣;陳振婭;毋彤
• 申請（專利權）人: 北京理工大學
• 主分類號: C07K14/21
• 分類號: C07K14/21;C12N15/31;C12N15/70;C12N15/65;C12N1/21;C12Q1/6897;C12Q1/02;C12Q1/04;C12R1/19
• 代理公司: 北京瑞盛銘杰知識產權代理事務所(普通合伙) 11617
• 代理人: 栗華楠

1.一種BmoR突變體蛋白，其特征在于，是在序列表SEQ ID NO.1所示的野生型BmoR蛋白的基礎上發生包含W21R和/或E54V的突變獲得的。

2.如權利要求1所述的BmoR突變體蛋白，其特征在于，所述突變體蛋白具體為：

(1)序列表SEQ ID NO.3、5或7所示的氨基酸序列；或

(2)SEQ ID NO.3、5或7同源性75％以上的氨基酸序列；或

(3)在SEQ ID NO.3、5或7的基礎上進行一個或多個氨基酸替換，和/或缺失，和/或添加后獲得的具有SEQ ID NO.3、5或7相同功能的氨基酸序列。

3.權利要求1所述BmoR突變體在檢測含有正丁醇的樣品，或在篩選正丁醇生產菌株中的應用。

4.權利要求1所述BmoR突變體在構建檢測正丁醇的生物傳感器中的應用。

5.權利要求1所述BmoR突變體的編碼基因。

6.如權利要求5所述的編碼基因，其特征在于，如序列表SEQ ID NO.4、6或8所示。

7.包含權利要求5所述編碼基因的重組質粒或重組菌株。

8.一種生物傳感器，其特征在于，所述的傳感器是包含權利要求5所述突變體編碼基因、由BmoR突變體激活的啟動子P_bmo、由P_bmo驅動的報告基因和表達BmoR突變體的啟動子的表達元件。

9.如權利要求8所述的生物傳感器，其特征在于，所述報告基因包括但不限于gfp、rfp、cfp、sfgfp、egfp、yfp、ecfp基因。

10.如權利要求8所述的生物傳感器，其特征在于，表達BmoR突變體的啟動子包括但不限于P_bmoR、P_tac、P_T7、P_LlacO1。

11.如權利要求8所述的生物傳感器，其特征在于，所述傳感器是將由P_bmoR啟動的突變體編碼基因連接至colE1復制起始位點、amp^r和P_bmo啟動的gfp基因所得。

12.如權利要求8所述的生物傳感器，其特征在于，啟動子P_bmo的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.10所示。

13.權利要求8所述生物傳感器在檢測含有正丁醇的環境、食品、醫學、生物類樣品，及篩選生產正丁醇的菌株中的應用。