[發明專利]靶向Smo蛋白的Hedgehog信號通路抑制劑及制備方法和用途

有效

• 申請號: 202110356792.6
• 申請日: 2021-04-01
• 公開（公告）號: CN113072607B
• 公開（公告）日: 2022-04-19
• 發明（設計）人: 高麗娟;葉益萍;李曉譽;徐世芳;黃文康;張蒙珍
• 申請（專利權）人: 杭州醫學院
• 主分類號: C07J43/00
• 分類號: C07J43/00;A61K31/58;A61K31/706;A61P35/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 鄭海峰

本發明提供了一類靶向Smo蛋白的Hedgehog(Hh)信號通路抑制劑及其制備方法和用途，本發明通過浸提、溶劑分配、色譜柱分離和HPLC純化等系列流程制備得到3個新型靶向Smo蛋白的Hedgehog信號通路抑制劑。這3個天然生物堿化合物在Shh?lightⅡ細胞中表現出顯著的Hedgehog信號通路抑制活性，并在與熒光環巴胺競爭性結合Smo的實驗中表現出明顯的競爭活性，表明是它們是靶向Smo蛋白從而抑制Hh信號通路。以此類化合物為先導化合物，進行結構優化，可為治療Hedgehog信號通路異常激活相關疾病特別是Smo抑制劑的新藥研發提供候選藥物，將具有重要的現實意義。這一類靶向Smo蛋白的Hedgehog信號通路抑制劑化合物1?3的結構式如下：

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，涉及一類靶向Smo蛋白的Hedgehog信號通路抑制劑及制備方法，以及其在制備治療Hedgehog信號通路相關疾病藥物中的應用。

背景技術

Hedgehog(Hh)信號通路在胚胎發育、組織生長和分化等多種生理過程中起關鍵作用，并與多種人類腫瘤的發生和發展密切相關，如胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、胃癌以及兒童常見腦部疾病髓母細胞瘤(medulloblastoma，MB)等。Hh信號通路主要由Shh配體蛋白、12次跨膜蛋白Patched(Ptch)、跨膜信號轉導蛋白Smoothened(Smo)以及核轉錄因子Glioma-associated oncogene(Gli)等組成。當Hh配體與Ptch1結合，Ptch1解除對Smo蛋白的抑制，Smo蛋白被磷酸化激活并轉運至初級纖毛，Gli釋放促使GliA入核，從而激活靶基因的轉錄和表達；反之，在沒有Hh配體存在時，Ptch抑制Smo蛋白的纖毛轉移，促使Gli被磷酸化后變成阻遏子GliR，進入核內從而阻斷靶基因的轉錄。由此可見，Hh信號通路小分子抑制劑的發現為治療Hh信號通路異常激活相關疾病提供一條切實可行的策略。

藜蘆屬植物在抗腫瘤、保護肝臟等方面均有良好的藥理作用。迄今為止，從藜蘆屬中分離所得的100多種結構多樣性的生物堿，大多為膽甾烷生物堿，主要包括五種結構類型：cevanine、veratramine(藜蘆胺)、jervanine(介芬胺)、solanidine(龍葵胺)和verazine型，其中，jervanine型代表性生物堿cyclopamine(環巴胺)(IC₅₀＝300nM)和jervine(IC₅₀＝80nM)是重要的Hh信號通路抑制劑。研究表明它們主要作用于Smo蛋白的7TM區域而抑制下游信號傳導通路。但是，由于酸不穩定性和生物利用度低，限制了該類生物堿的應用。Vismodegib與Sonidegib為FDA批準上市(2012和2015年)的2個靶向Smo蛋白的Hedgehog通路抑制劑，但隨之出現的副作用及突變引發的耐藥給患者帶來嚴重影響。因此，在不同屬的藜蘆中尋找新的具有靶向Smo蛋白的Hh信號通路抑制活性且作用靶點的新型化合物變得極其重要。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術的不足，提供了一類靶向Smo蛋白的Hedgehog信號通路抑制劑及制備方法，以及其在制備治療Hedgehog信號通路相關疾病藥物中的應用。

本發明首先提供了一類靶向Smo蛋白的Hedgehog信號通路抑制劑，所述化合物具有如下式1-3任一所述的結構：

本發明還提供了所述靶向Smo蛋白的Hedgehog信號通路抑制劑的制備方法，其是從毛葉藜蘆中提取一類靶向Smo蛋白的Hedgehog信號通路抑制劑的方法，通過以下技術方案實現：

(1)將毛葉藜蘆的全株粉碎，經提取溶劑提取得到提取物；提取物通過氧化鋁柱層析分離，以醇水洗脫體系洗脫，薄層色譜檢測，得到含生物堿粗組分；含生物堿粗組分進行乙酸乙酯和水溶劑分配，得乙酸乙酯層萃取物；