[發(fā)明專利]一種羅氏沼蝦外源基因的表達(dá)質(zhì)粒及其轉(zhuǎn)錄表達(dá)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110346557.0
• 申請日: 2021-03-31
• 公開（公告）號: CN113234755B
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 任晉東;牛寶龍;樓寶;俞奇力
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;C07K14/435
• 代理公司: 北京匯捷知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11531
• 代理人: 趙艷

1.一種外源基因體內(nèi)表達(dá)質(zhì)粒，其特征在于，所述表達(dá)質(zhì)粒將外源基因帶入羅氏沼蝦體內(nèi)進(jìn)行表達(dá)，該表達(dá)質(zhì)粒包括順序排列的hr5增強(qiáng)子、轉(zhuǎn)錄啟動子IE1、外源目標(biāo)基因和終止子；其中，所述hr5增強(qiáng)子為苜蓿丫紋夜蛾核型多角體病毒轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件，其核苷酸序列如SEQ?ID?No：1所示；所述轉(zhuǎn)錄啟動子IE1為白斑病毒轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件，其核苷酸序列如SEQID?No：2所示。

2.一種外源基因在羅氏沼蝦的活體肌肉內(nèi)的轉(zhuǎn)錄表達(dá)方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

(1)以10ug質(zhì)粒每g蝦體重的量，從沼蝦腹部頭胸甲和軀干交界線插入微量注射器并注射權(quán)利要求1所述的表達(dá)質(zhì)粒，每只蝦注射量控制在5μL～20μL的范圍內(nèi)；

(2)注射外源表達(dá)質(zhì)粒4～12h后，采集羅氏沼蝦軀干肌肉組織，并驗(yàn)證外源目標(biāo)基因的表達(dá)量。