[發明專利]一種高靈敏SARS-CoV-2中和抗體的檢測方法、檢測試劑盒

有效

• 申請號: 202110344480.3
• 申請日: 2021-03-31
• 公開（公告）號: CN112730851B
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: 張玉基
• 申請（專利權）人: 南京立頂醫療科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 南京佰騰智信知識產權代理事務所(普通合伙) 32509
• 代理人: 胡麗華

1.一種高靈敏SARS-CoV-2中和抗體的檢測方法，其特征在于，基于夾心法結合阻斷法實現SARS-CoV-2中和抗體的檢測，通過添加捕獲線的方式，將靶向RBD的非中和抗體提前捕獲，增強后續通過夾心法檢測中和抗體的特異性；通過捕獲線、檢測線和RBD蛋白標記物的設計，利用RBD蛋白標記物捕獲樣品中靶向RBD的非中和抗體，形成抗體-RBD蛋白-標記載體復合物，并通過捕獲線中的ACE2蛋白捕捉RBD蛋白，從而將靶向RBD的非中和抗體固定在捕獲線上；而中和抗體被RBD蛋白標記物捕獲后形成的中和抗體-RBD蛋白-標記載體復合物不能被捕獲線被捕獲，隨著層析到達檢測線處，被檢測線處的RBD捕獲，形成包被RBD蛋白-中和抗體-RBD蛋白-標記載體復合物，使檢測線出現相應的信號，并通過此信號判斷樣本中的中和抗體濃度。

2.一種基于權利要求1所述的檢測方法的高靈敏SARS-CoV-2中和抗體檢測試劑盒，其特征在于，包括捕獲線，所述捕獲線包被有ACE2蛋白。

3.根據權利要求2所述的檢測試劑盒，其特征在于，在所述捕獲線的一側依次設有檢測線、質控線、吸水墊，在所述捕獲線的另一側依次設有結合墊、樣品墊；

所述捕獲線、檢測線、質控線均設置在NC膜上；

所述檢測線上包被有RBD蛋白，所述結合墊設置有RBD蛋白標記物，所述RBD蛋白標記物包括標記載體和結合于所述標記載體上的RBD蛋白。

4.根據權利要求3所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述標記載體包括膠體金、乳膠微球、納米碳、磁微球或熒光微球中的一種或多種。

5.根據權利要求3所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述樣品墊上還設有濾血墊或抗RBC抗體。

6.根據權利要求3所述的檢測試劑盒，其特征在于，其檢測結果判定方法通過直接觀測捕獲線、檢測線和質控線的反應結果，來判斷SARS-CoV-2中和抗體含量。

7.根據權利要求3所述的檢測試劑盒，其特征在于，其檢測結果判定方法通過采用儀器讀取捕獲線、檢測線和質控線的反應結果，并通過檢測線和質控線的比值判斷SARS-CoV-2中和抗體含量。