[發明專利]一種卡痛抗原及其制備方法、應用

在審

• 申請號: 202110344150.4
• 申請日: 2021-03-30
• 公開（公告）號: CN113354725A
• 公開（公告）日: 2021-09-07
• 發明（設計）人: 鄭智彪;鄭曙劍
• 申請（專利權）人: 杭州隆基生物技術有限公司
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765;C07K1/107;C12N5/20;C07K16/16;C07D471/14
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏;何俊

本發明涉及生物檢測領域，本發明公開了一種卡痛抗原及其制備方法、應用，本發明的帽柱木堿完全抗原和7羥基帽柱木堿完全抗原比較完整地保留分子結構中的活性基團，因而具有較強的特異性和較高的靈敏度。

技術領域

本發明涉及生物檢測領域，尤其涉及一種卡痛抗原及其制備方法、應用。

背景技術

卡痛，茜草科，是一種生長在東南亞的精神活性植物，特別是在泰國和馬來西亞。.新鮮或者干燥的卡痛葉可以通過吸食、咀嚼或泡茶食用。低劑量的卡痛有刺激作用，長期以來被東南亞體力勞動者作為興奮劑來抵消工作疲勞使用；高劑量的卡痛具有鎮靜-麻醉效果。

卡痛的藥理功能主要是通過生物堿7-羥基帽柱木堿(式II)和帽柱木堿(式I)實現的。雖然這些生物堿分子的結構和致幻劑相似，但是這些物質沒有致幻劑活性。相反地，這些生物堿主要與腎上腺素和阿片受體相互作用。因此，常常用來阻止或緩解阿片類藥物依賴患者的戒斷癥狀，或者被用來降低對阿片類藥物的依賴。由于卡痛葉的延緩戒斷綜合征作用，其也有一定的被濫用為毒品的風險。研究發現食用卡痛后會出現口干、出汗、頭暈、排尿增加或減少、食欲下降以及惡心或嘔吐。長期使用可能產生的副作用有厭食和體重下降、失眠、煩躁不安、睡眠障礙、出現幻覺以及產生依賴性。

據美國《紐約時報》，在泰國，卡痛葉的來源豐富，其生物堿的提前提取方法簡單，很多青少年已經淪為卡痛葉成癮者。通常將從卡痛葉中提取的汁液與止咳糖漿、可口可樂和冰塊混合而成。卡痛在其天然狀態下具有相對的安全性，高濃度的生物堿類提取物比未經加工的葉片更具危害性，而且，卡痛若與鎮靜劑如酒精等混合使用，有可能產生累加效應。與任何共同吞下的物質相互摻雜或污染也是風險之一。在歐洲，非法摻入了未公開的合成阿片受體激動劑O-去甲基曲馬多以及咖啡因等其他物質的某些品牌的卡痛已被曝光。2010～2011年瑞典有9人的死亡便與摻入了幾種其他物質而非純天然卡痛的卡痛制品有關。因此，建立特異性強，靈敏度高的卡痛檢測試劑盒意義重大。

要建立卡痛的免疫檢測方法，必須獲得具有抗原活性的卡痛全抗原。但現有的卡痛全抗原通常存在抗原活性較低的問題。例如，公開號為CN108732345A的中國專利文獻公開了一種檢測人唾液中帽柱木堿及其衍生物和代謝物的檢測試紙及制備方法，該帽柱木堿通過在苯環上引入丁二酸酐形成帽柱木堿半琥珀酸酯衍生物，使其能與牛血清蛋白偶聯制成全抗原，該方法通過一步反應即可制得卡痛全抗原，制備方法簡單，但是該方法中仲胺未得到保護，引入丁二酸酐會出現兩個位點，偶聯位點不明、臂長過短，容易被大分子載體蛋白覆蓋活性位點而無法保留卡痛分子中的活性基團，故獲得的全抗原存在抗原活性低、特異性差、靈敏度低的問題。

發明內容

為了解決上述技術問題，本發明提供了一種卡痛抗原及其制備方法、應用。本發明的帽柱木堿完全抗原和7羥基帽柱木堿完全抗原比較完整地保留分子結構中的活性基團，因而具有較強的特異性和較高的靈敏度。

本發明的具體技術方案為：

第一方面，本發明提供了一種卡痛抗原，包括帽柱木堿完全抗原和7羥基帽柱木堿完全抗原。

所述帽柱木堿完全抗原的分子結構式如下所示：

7羥基帽柱木堿完全抗原的分子結構式如下所示：

其中，R表示載體蛋白。