[發(fā)明專利]同時測定苗藥隔山消中8個指標成分的含量的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110342208.1
• 申請日: 2021-03-30
• 公開（公告）號: CN113075325B
• 公開（公告）日: 2022-12-20
• 發(fā)明（設計）人: 孫佳;秦蘭;劉春花;陸苑;潘潔;鄭林;馬雪;李勇軍
• 申請（專利權）人: 貴州醫(yī)科大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72;G01N30/88;G01N30/86;G01N30/34;G01N30/06;G01N30/14
• 代理公司: 貴陽中新專利商標事務所 52100
• 代理人: 李余江

本發(fā)明公開了一種同時測定苗藥隔山消中8個指標成分的含量的方法，該方法通過建立超高效液相色譜?串聯(lián)質譜UPLC?ESI?MS法同時測定苗藥隔山消中告達亭、松脂素、白首烏二苯酮、阿魏酸、沒食子酸、東莨菪內酯、丁香酸、綠原酸8個指標成分的含量；采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈色譜柱，2.1 mm×100 mm，1.7μm，以0.1%甲酸水溶液?0.1%甲酸乙腈溶液為流動相，梯度洗脫，流速0.35 mL/min，柱溫40℃，采用電噴霧離子源ESI，多反應離子監(jiān)測MRM模式檢測。本發(fā)明方法簡單、快捷，靈敏度高，專屬性好，可為隔山消藥材的質量控制提供參考依據(jù)。

技術領域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術領域，具體地說是涉及一種UPLC-ESI-MS法同時測定苗藥隔山消中8個指標成分的含量的方法。

背景技術

隔山消又名飛來鶴、過山消、白首烏等，為蘿藦科白前屬植物耳葉牛皮消Cynanchum auriculatum Royle ex Wight的干燥塊根，主要產于湖南、湖北，四川等地，為云貴地區(qū)少數(shù)民族常用的藥材，民間以塊根入藥，在我國已有悠久的藥用歷史，始載于宋朝《開寶本草》，現(xiàn)收載于《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》(2003年版)。現(xiàn)代研究表明隔山消中主要含有苯乙酮類、甾體苷類、有機酸類、香豆素類、木脂素類等多種化學成分，具有促進胃腸道運動的作用、免疫調節(jié)作用、抗腫瘤作用、抗衰老作用、保肝等作用。

《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》(2003年版)隔山消質量標準中僅收載了其性狀、鑒別、薄層色譜鑒別、性味、功能主治、用法用量及儲藏條件等進行了描述，而對其成分的含量測定鮮見報道。目前隔山消的研究主要集中在化學成分的分析與分離提取上，曹雨等應用UPLC-Q-Exactive技術快速歸屬和鑒定隔山消抗神經氨酸酶最佳活性部位中的化學成分，謝凱強利用HPLC和H-NMR對隔山牛皮消、耳葉牛皮消和戟葉牛皮消三種民間稱之為“隔山消”的植物中C₂₁-甾體苷元類化學成分進行分析并建立了指紋圖譜，而對于其化學成分的含量測定報告較少、方法單一且耗時長，孫佳等采用HPLC同時測定隔山消中5個成分的含量，肖培云等采用HPLC法測定隔山消中沒食子酸的含量。而中藥的化學成分具有復雜性與多樣性的特點，同時也是其發(fā)揮療效的物質基礎，在中藥內有效成分尚不明確的情況下若只采用一個或幾個少數(shù)指標進行質量的評價，則不能全面真實反映藥材的質量狀況。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于為完善隔山消質量標準，提供一種UPLC-ESI-MS法同時測定苗藥隔山消中8個指標成分的含量的方法，以期進一步為隔山消的質量控制提供實驗依據(jù)。

本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的：

一種同時測定苗藥隔山消中8個指標成分的含量的方法，該方法通過建立超高效液相色譜-串聯(lián)質譜(UPLC-ESI-MS)法同時測定苗藥隔山消中告達亭、松脂素、白首烏二苯酮、阿魏酸、沒食子酸、東莨菪內酯、丁香酸、綠原酸8個指標成分的含量；采用ACQUITY UPLCBEH C₁₈色譜柱(2.1mm×100mm，1.7μm)，以0.1％甲酸水溶液-0.1％甲酸乙腈溶液為流動相，梯度洗脫，流速0.35mL/min，柱溫40℃，采用電噴霧離子源(ESI)，多反應離子監(jiān)測(MRM)模式檢測。

其中，該方法采用ACQUITY系統(tǒng)超高效液相色譜-三重四級桿串聯(lián)質譜儀，包括二元梯度泵、自動進樣器、柱溫箱、三重四級桿質量分析器和Masslynx4.1質譜工作站，Allegra 64R型低溫高速離心機，ZH-2型渦旋混合器，AE240型十萬分之一電子天平，F(xiàn)L-UP-YZ-20型超純水儀，KQ-250E型超聲波清洗器。