[發(fā)明專利]一株綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110341911.0
• 申請(qǐng)日: 2021-03-30
• 公開（公告）號(hào): CN112920976B
• 公開（公告）日: 2023-01-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉茂軍;毛立;李文良;楊蕾蕾;張紋紋;孫敏;杜改梅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A61K39/02;A61P31/04;A61P11/00;A01K67/027;C12R1/35
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務(wù)所 32237
• 代理人: 仲凌霞;肖明芳

1.一株綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株，其特征在于，所述綿羊肺炎支原體的分類命名為綿羊肺炎支原體（Mycoplasma ovipneumoniae）NJ01株，已保藏在中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號(hào)為CCTCC NO：M 2020907，保藏日期為2020年12月14日。

2.一株綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株在建立綿羊肺炎支原體感染發(fā)病模型中的應(yīng)用，其特征在于，所述綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株為權(quán)利要求1所述綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，將所述綿羊肺炎支原體感染發(fā)病模型用于研究綿羊肺炎支原體的致病機(jī)制，或用于評(píng)估綿羊肺炎支原體疫苗的效力。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，將所述綿羊肺炎支原體感染發(fā)病模型用于非治療目的的抗綿羊肺炎支原體感染藥物的評(píng)價(jià)。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述綿羊肺炎支原體感染發(fā)病模型的建立方法為采用所述綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株的攻毒制劑進(jìn)行攻毒感染；其中，所述綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株的攻毒制劑為綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株培養(yǎng)物和/或綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株制備的其他攻毒制劑；其中，所述感染的途徑為氣管內(nèi)注射。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述攻毒制劑中，所述綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株的濃度為10⁵ CCU/mL以上。

7.一株綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株在制備治療羊支原體肺炎藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株為權(quán)利要求1所述綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物為疫苗或抗血清。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述疫苗由所述綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株的培養(yǎng)物配置而成，每頭份包含如下組分：綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株NJ01株不低于2.86×10⁸ CCU，免疫佐劑5%-75% g/g。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述綿羊肺炎支原體強(qiáng)毒株培養(yǎng)物的培養(yǎng)方法包括如下步驟：

（1）將綿羊肺炎支原體NJ01株按照1:3-1:10的體積比接種支原體液體培養(yǎng)基，在36-38℃下培養(yǎng)24-72 h傳代，待培養(yǎng)物變成橙黃-黃色時(shí)，得到第一代培養(yǎng)物；

（2）將第一代培養(yǎng)物以1:5以上的體積比接種支原體液體培養(yǎng)基中，在36-38℃下培養(yǎng)24-72 h傳代，待培養(yǎng)物變成橙黃-黃色時(shí)，得到第二代培養(yǎng)物；

（3）重復(fù)第（2）步繼續(xù)傳代，待培養(yǎng)物變成橙黃-黃色時(shí)，收獲即得。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的應(yīng)用，其特征在于，所述支原體液體培養(yǎng)基中各組分含量及制備方法為：Eagles液40%-50% v/v，水解乳蛋白0.005-0.02 g/mL，pH 7.4的磷酸鹽緩沖液30%-40% v/v，0.04 g/mL酚紅0.15%-0.2% v/v；用NaOH調(diào)pH值為7.4-7.6，高壓滅菌后，加入無菌血清10%-20% v/v，鮮酵母浸出汁1%-2% v/v。