[發明專利]一種新型CCK8細胞活力檢測試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 202110333184.3
• 申請日: 2021-03-29
• 公開（公告）號: CN113122607B
• 公開（公告）日: 2022-01-04
• 發明（設計）人: 謝素瑤;朱宇;陳澤新;黃敏
• 申請（專利權）人: 創芯國際生物科技（廣州）有限公司
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;C12Q1/32
• 代理公司: 廣州容大知識產權代理事務所(普通合伙) 44326
• 代理人: 劉新年

1.一種CCK8檢測試劑盒，其特征在于：包括添加因子一和添加因子二；所述添加因子一包括以下終濃度的組分：透明質酸酶0.5-1mg/mL，EDTA0.1-0.5mg/mL，鹽酸0.02-0.05mol/L；所述添加因子二包括以下終濃度的組分：wst-8 0.08-0.2mg/mL，1-Methoxy PMS 0.05-0.3mg/mL，鈣鹽0.1-0.5mg/mL；所述鈣鹽包括氯化鈣、硝酸鈣、硫酸鈣、磷酸鈣中的至少一種；所述添加因子一和所述添加因子二的溶劑均為無菌水。

2.根據權利要求1所述的一種CCK8檢測試劑盒，其特征在于：所述添加因子一的制備及保存方法為：按照組分的終濃度配料，將透明質酸酶、EDTA和鹽酸混合均勻并溶解后，0.22μm濾膜過濾，于-20℃保存。

3.根據權利要求1所述的一種CCK8檢測試劑盒，其特征在于：所述添加因子二的制備及保存方法為：按照組分的終濃度配料，將wst-8、1-Methoxy PMS、鈣鹽和無菌水混合均勻并溶解后，0.22μm濾膜過濾，于-20℃保存。

4.根據權利要求1所述的一種CCK8檢測試劑盒，其特征在于：所述鈣鹽為氯化鈣。

5.權利要求1～4任意一項所述的一種CCK8檢測試劑盒在類器官藥敏活力檢測中的應用。

6.一種類器官藥敏活力檢測方法，其特征在于：包括：

(1)將類器官樣本接種于孔板中，培養48-72h后進行藥物接觸；

(2)加藥96h后在孔板中加入權利要求1～4任意一項所述的試劑盒的添加因子一繼續培養20～30min；

(3)繼續在孔板中加入權利要求1～4任意一項所述的試劑盒的添加因子二培養2-4h，于450nm進行活力檢測。