[發明專利]一種識別絲織品的桑蠶單克隆抗體的膠體金標記方法在審
| 申請號： | 202110331517.9 | 申請日： | 2021-03-29 |
| 公開（公告）號： | CN112986566A | 公開（公告）日： | 2021-06-18 |
| 發明（設計）人： | 王秉;閆琳;馬維維;彭志勤;萬軍民 | 申請（專利權）人： | 浙江理工大學 |
| 主分類號： | G01N33/577 | 分類號： | G01N33/577;G01N33/532 |
| 代理公司： | 浙江永航聯科專利代理有限公司 33304 | 代理人： | 蔡鼎 |
| 地址： | 310018 浙江省杭州市錢塘*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 識別 絲織品 桑蠶 單克隆抗體 膠體 標記 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種識別絲織品的桑蠶單克隆抗體的膠體金標記方法，其特征在于包括以下步驟：
1）取超聲后分散均勻的膠體金8-12ml，加入碳酸鉀溶液調節pH為8.0~9.0；
2）取桑蠶單克隆抗體用pH=8的PBS緩沖液稀釋至濃度為10~20ug/ml；
3）將步驟1）所得膠體金以25-35滴/min的速度滴加至步驟2）所得桑蠶單克隆抗體溶液中，室溫勻速攪拌45~60min；
4）向步驟3）所得溶液中添加BSA至其終濃度為0.3-0.5wt%，進行蛋白的封閉，繼續攪拌8-12min；
5）向步驟4）所得溶液中添加PEG-20000至其終濃度為0.15-0.25wt%，繼續攪拌8-12min；
6）將步驟5）所得標記好的膠體金在12000~15000rpm下離心15~30min，棄上清液；
7）沉淀物用含0.8-1.2wt%BSA、0.03-0.05wt%疊氮鈉的0.01mol/L的PBS溶液重懸，做防腐處理，冷藏備用。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1）中，調節pH為8.2。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2）中，稀釋至濃度為20 ug/ml。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟3）中，室溫勻速攪拌60min。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟6）中，在12000r/min下離心30 min。
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