[發明專利]三七姜乙酸乙酯部位的指紋圖譜和質量分析方法

有效

• 申請號: 202110331139.4
• 申請日: 2021-03-26
• 公開（公告）號: CN113063872B
• 公開（公告）日: 2022-11-18
• 發明（設計）人: 梁潔;徐遠鴻;曹玉嬪;柳賢福;孫正伊;趙立春
• 申請（專利權）人: 廣西中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 南寧啟創知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 45122
• 代理人: 謝美萱

本發明公開了一種三七姜乙酸乙酯部位的指紋圖譜和質量分析方法，屬于藥品分析技術領域,首先建立了三七姜乙酸乙酯部位的指紋圖譜，利用三七姜乙酸乙酯部位的指紋圖譜與鎮痛抗炎建立譜效關系，并基于所述譜效關系建立三七姜質量評價標準；闡明三七姜乙酸乙酯部位中的化學成分與鎮痛抗炎藥效之間的相關性；對三七姜提取物的藥效研究，探討三七姜外用藥理作用位，為之后的深入研究提供科學依據。

技術領域

本發明屬于藥品分析技術領域，尤其是涉及一種三七姜乙酸乙酯部位的指紋圖譜和質量分析方法。

背景技術

三七姜在《廣西中草藥》中記載有活血散瘀、消腫止痛之功?！稄V西民族藥簡編》載：外用搗爛敷患處治跌打損傷。《全國中草藥匯編》中記載主治跌打損傷，風濕骨痛。《中華本草》記載：治療跌打損傷，外用酒炒熱敷患處?，F代藥理研究，三七姜醇提物具有抗炎作用。民間常以三七姜根莖入藥作為野生草藥使用后，發現對風濕性骨關節疼痛有一定療效。用于治療風濕骨痛，吐血衄血，月經過多等疾病，炒炭后研粉撒患處用于散淤消腫、活血止血、行氣止痛、跌打損傷、蟲咬蛇傷、外傷出血等。

近年來，中藥指紋圖譜分析技術的廣泛應用推動了其發展，不僅提升了中藥材和中成藥的質量標準也讓產品整體質量水平得以進步。但目前沒有關于三七姜指紋圖譜的研究，且目前對指紋圖譜的評價多采用相似度分析作為基本評價方法，對三七姜的外用功能相關方面的研究報道較少。

因此，為了篩選出三七姜的藥效活性部，對三七姜提取物的藥效研究，探討三七姜外用藥理作用位，為之后的深入研究提供科學依據，需要對三七姜有效藥用部位進行研究、確立標準指紋圖譜和質量分析方法。

發明內容

為解決上述問題，本發明提供一種三七姜乙酸乙酯部位的指紋圖譜和質量分析方法，確定了三七姜的標準指紋圖譜，通過對三七姜乙酸乙酯部位的鎮痛抗炎藥效與指紋圖譜建立譜效關系的分析，闡明三七姜乙酸乙酯部位中的化學成分與鎮痛抗炎藥效之間的相關性。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

三七姜乙酸乙酯部位的指紋圖譜，是采用如下方法構建的：

(1)供試品溶液的制備：

①制備三七姜乙醇提取物：稱取三七姜粗粉，粉碎后過16目篩，加入其7-8倍體積量的80％乙醇溶液，加熱回流提取2h，重復3次，濾過并收集濾液，合并濾液，減壓濃縮至無醇味，得到乙醇總提取物；

②提取乙酸乙酯部位：將所述乙醇總提取物用純水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取至溶液顏色至澄清透明，得到乙酸乙酯萃取部位的藥液，減壓濃縮，放置水浴蒸干，即得到乙酸乙酯部位提取物，備用；

③制備供試品溶液：取乙酸乙酯部位提取物0.1g，精密稱定，用5mL甲醇超聲提取5min，加甲醇定容至10mL，過濾，將所述濾液13000r/min離心10min，取上清液，過0.22μm微孔濾膜，即得供試品溶液；

(2)對照品溶液的制備：各稱取對羥基苯甲酸、原兒茶酸、對羥基苯甲醛對照品，分別加甲醇溶解制備質量濃度分別為0.212、0.236、0.149mg/mL的混合對照品溶液；

(3)采用高效液相色譜法分析上述供試品溶液和對照品溶液，按照如下色譜條件進行色譜圖采集，采用液相工作站對色譜圖處理，再導入至中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統軟件中，得到對指紋圖譜；所述色譜條件為：進樣量10μL；以乙腈為流動相B，0.1％磷酸溶液或0.1％甲酸溶液或0.1％冰醋酸溶液為流動相A，進行梯度洗脫:0min→20min、10％→60％B，20min→50min、60％→80％B，50min→65min、80％→100％B，65min→75min、100％B，流速：0.8～1.2mL/min，柱溫30℃，檢測波長260nm。

進一步地，所述流動相A為0.1％磷酸溶液；所述流速為0.8mL/min。