[發明專利]一種低清洗殘留磁珠及其制備方法

有效

• 申請號: 202110329505.2
• 申請日: 2021-03-28
• 公開（公告）號: CN112979772B
• 公開（公告）日: 2022-06-24
• 發明（設計）人: 楊志偉;劉錚;胡春苗
• 申請（專利權）人: 江蘇集萃分子工程研究院有限公司;蘇州易萊生物技術有限公司
• 主分類號: C07K14/36
• 分類號: C07K14/36;C07K1/13;C07K1/113;C07C51/09;C07C59/68;C07C67/31;C07C69/712
• 代理公司: 蘇州瞪羚知識產權代理事務所(普通合伙) 32438
• 代理人: 張宇

1.一種低清洗殘留磁珠，其特征在于：其結構如下：

其中，SA為蛋白質分子鏈霉親和素。

2.根據權利要求1所述的低清洗殘留磁珠，其特征在于：所述磁珠是由羥基和炔基表面修飾的磁珠與三[(1-芐基-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基]胺-銅（I）絡合物和疊氮化合物標記的鏈霉親和素進行反應制得。

3.根據權利要求2所述的低清洗殘留磁珠，其特征在于：所述羥基和炔基表面修飾的磁珠是由氨基磁珠與活化酯混合物進行反應制得，所述活化酯混合物是由5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸、4-戊炔酸、二環己基碳二亞胺和、N-羥基丁二酰亞胺和DMF反應制得。

4.根據權利要求3所述的低清洗殘留磁珠，其特征在于：所述氨基磁珠與活化酯混合物進行反應具體步驟為：1）將5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸和4-戊炔酸置于反應管中，加入二環己基碳二亞胺和N-羥基丁二酰亞胺和DMF，進行反應得到活化酯混合物，其中，所述的5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸、4-戊炔酸、二環己基碳二亞胺和、N-羥基丁二酰亞胺和DMF的質量體積比為50mg:25mg:25mg:13mg:1mL；2）向氨基磁珠中加入所制得的活化酯混合物，室溫下震蕩反應，然后加入TFA的DMF溶液，得到羥基和炔基表面修飾的磁珠。

5.根據權利要求4所述的低清洗殘留磁珠，其特征在于：所述的5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸，其由如下步驟制得：

1）制備第一反應溶液，向5-羥基戊酸芐酯溶液中加入4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷、4-二甲氨基吡啶，在氬氣保護下進行反應，得到所述第一反應溶液；

2）制備有機產物，將步驟1）所述第一反應溶液進行分離后得到的有機相進行洗滌干燥，得到所述有機產物；

3）制備第二反應溶液，向所述有機產物中加入乙酸乙酯、三乙胺和催化劑Pd/C，通入氫氣后進行反應，得到所述第二反應溶液；

4）將所述第二反應溶液進行過濾、真空除去溶劑后，制得5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸。

6.根據權利要求5所述的低清洗殘留磁珠，其特征在于：

所述的5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸的結構式為：

；

所述有機產物的結構式為：

。

7.根據權利要求2所述的低清洗殘留磁珠，其特征在于：所述的疊氮化合物標記的鏈霉親和素是由鏈霉親和素和5-疊氮戊酸的N-羥基丁二酰亞胺酯進行震蕩反應后純化制得，所述5-疊氮戊酸的N-羥基丁二酰亞胺酯由5-疊氮戊酸、二環己基碳二亞胺和 N-羥基丁二酰亞胺和DMF進行反應制得，其中，所述的5-疊氮戊酸、二環己基碳二亞胺、N-羥基丁二酰亞胺和DMF的質量體積比為14.3mg:25mg:13mg:1 mL。

8.一種制備如權利要求1所述低清洗殘留磁珠的方法，其特征在于：其包括制備步驟：

1）活化酯混合物的制備

將5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸和4-戊炔酸置于反應管中，加入二環己基碳二亞胺和N-羥基丁二酰亞胺和DMF，室溫下進行反應得到活化酯混合物，其中，所述的5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸、4-戊炔酸、二環己基碳二亞胺和、N-羥基丁二酰亞胺和DMF的質量體積比為50mg:25mg:25mg:13mg:1mL；

2）磁珠表面進行羥基和炔基的修飾

向氨基磁珠中加入步驟1）所制得的活化酯混合物，室溫下震蕩反應，然后加入TFA的DMF溶液，得到羥基和炔基表面修飾的磁珠；

3）低清洗殘留磁珠的制備

將步驟2）制得的羥基和炔基表面修飾的磁珠與三[(1-芐基-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基]胺-銅（I）絡合物和疊氮化合物標記的鏈霉親和素進行反應。