[發明專利]一種獲得完整植物葉脈的方法

在審

• 申請號: 202110327920.4
• 申請日: 2021-03-26
• 公開（公告）號: CN113049338A
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 劉龍昌;郭啟超;李衛清;周正軍;郭玉瑩
• 申請（專利權）人: 河南科技大學
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/30
• 代理公司: 洛陽公信知識產權事務所(普通合伙) 41120
• 代理人: 李現艷

1.一種獲得完整植物葉脈的方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟一：按體積比96:4~94:6取無水乙醇和冰醋酸配制成固定保存液A；

步驟二：將采集的植物葉片用清水洗凈，先用煮沸的水浸泡0~10 min，再放入質量濃度為4~6%的氫氧化鈉溶液中離析，離析時間為3~7天，待葉片的葉肉大量析出后，轉入蒸餾水中清洗；

步驟三：去除葉片的被毛，再放入蒸餾水中清洗；

步驟四：將步驟三中蒸餾水清洗后的葉片小心轉移至質量濃度為2~4%的次氯酸鈉溶液中，浸漬時間為25~35 min，待葉片完全變白，轉移至蒸餾水中清洗；

步驟五：將固定保存液A和蒸餾水制備成質量濃度為31~35%的固定保存液A和質量濃度為64~70%的固定保存液A，將步驟四處理后的葉片先放入質量濃度為31~35%的固定保存液A中處理10~30 min，再放入質量濃度為64~70%的固定保存液A中處理10~30min，最后放入固定保存液A中處理10~14h；

步驟六：將步驟五處理后的葉片放入質量濃度為0.5~1.5%的番紅酒精染色劑中染色25~35 min；

步驟七：將步驟六中染色好的葉片放入無水乙醇和二甲苯混合液中5~10 min，然后將葉片轉移至二甲苯中5~15 min，待葉片透明，葉脈完全展露出來，即可做切片；

步驟八：將切片自然晾干6~8天，放入切片盒中保存。

2.根據權利要求1所述的一種獲得完整植物葉脈的方法，其特征在于：步驟二中的葉片可以是新鮮葉片，也可以是臘葉標本葉片。

3.根據權利要求1所述的一種獲得完整植物葉脈的方法，其特征在于：步驟二中不同種類葉片的處理方法為：質地較厚硬的葉片，先用煮沸的水浸泡1~2 min，然后放入質量濃度為4~6%氫氧化鈉溶液中離析；臘葉標本葉片，先用煮沸的水浸泡5~10 min，再放入質量濃度為4~6%氫氧化鈉溶液中離析； 質地薄軟的草本植物葉片，直接放入質量濃度為4~6% 氫氧化鈉溶液中離析。

4.根據權利要求1所述的一種獲得完整植物葉脈的方法，其特征在于：步驟三中葉片的被毛去除方法為：將用蒸餾水清洗后的葉片轉移到無水乙醇中，葉片若不平整，先用玻璃片壓平，8~12 min后在無水乙醇中用毛刷輕輕的朝一個方向刷。

5.根據權利要求1所述的一種獲得完整植物葉脈的方法，其特征在于：步驟七中的混合溶液中，無水乙醇的體積份數為40~60%，二甲苯的體積份數為40~60%。