[發明專利]基于AFM1抗獨特型納米抗體替代黃曲霉毒素M1 標準品的ELISA免疫分析方法有效
| 申請號: | 202110327701.6 | 申請日: | 2021-03-26 |
| 公開(公告)號: | CN113061188B | 公開(公告)日: | 2022-06-17 |
| 發明(設計)人: | 李培武;唐曉倩;白藝珍;王督;張奇 | 申請(專利權)人: | 中國農業科學院油料作物研究所 |
| 主分類號: | C07K16/42 | 分類號: | C07K16/42;G01N33/53;G01N33/543;G01N33/58 |
| 代理公司: | 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102 | 代理人: | 喬宇 |
| 地址: | 430062 湖*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 基于 afm1 獨特 納米 抗體 替代 黃曲霉 毒素 m1 base sub 標準 elisa | ||
1.一種黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體作為黃曲霉毒素M1標準品替代物的應用,所述黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體為黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體VHHC4,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于:包括如下步驟:
(1)黃曲霉毒素M1抑制標準曲線的建立:以黃曲霉毒素M1標準品作為競爭物,進行競爭抑制ELISA反應,檢測獲得結合率B/B0值,以黃曲霉毒素M1標準品的濃度對數值為橫坐標,以結合率B/B0值作為縱坐標,建立ELISA黃曲霉毒素M1抑制標準曲線;
(2)黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體抑制標準曲線的建立:以黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體VHHC4作為競爭物,進行競爭抑制ELISA反應,檢測獲得結合率B/B0值,以黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體VHHC4的濃度對數值為橫坐標,以結合率B/B0值作為縱坐標,建立ELISA黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體抑制標準曲線;
(3)黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體與黃曲霉毒素M1標準品的對應關系:根據黃曲霉毒素M1抑制標準曲線和黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體抑制標準曲線,計算出一定結合率B/B0值對應的黃曲霉毒素M1標準品濃度和黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體VHHC4的濃度,以同一結合率B/B0值對應的黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體VHHC4的濃度為橫坐標,以相同結合率B/B0值所對應的黃曲霉毒素M1標準品濃度為縱坐標,建立黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體與黃曲霉毒素M1標準品的線性關系曲線。
3.根據權利要求2所述的應用,其特征在于:步驟(3)中的結合率B/B0在20%~80%范圍內。
4.根據權利要求2所述的應用,其特征在于:步驟(3)黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體與黃曲霉毒素M1標準品的線性關系曲線中B/B0濃度間隔為10%。
5.根據權利要求2所述的應用,其特征在于:包括如下步驟:將待檢測樣品作為競爭物進行競爭抑制ELLSA反應,檢測獲得結合率B/B0值,代入黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體抑制標準曲線中計算出對應的黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體濃度;然后將黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體濃度代入黃曲霉毒素M1抗獨特型納米抗體與黃曲霉毒素M1標準品的線性關系曲線中,換算得到相應的黃曲霉毒素M1濃度。
6.根據權利要求5所述的應用,其特征在于:所述的待檢測樣品為乳產品。
7.根據權利要求6所述的應用,其特征在于:所述的乳產品包括牛奶,奶粉以及酸奶樣品。
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