[發明專利]一種用超聲逆流結合生物酶從薏苡莖葉提取豆甾醇的方法

有效

• 申請號: 202110327520.3
• 申請日: 2021-03-26
• 公開（公告）號: CN113512084B
• 公開（公告）日: 2023-09-26
• 發明（設計）人: 李童;覃春曉;林維嘉;農璨瑞;王翠霞;李惠芹;岑奕霖;雷智冬;陳石梅;黃鎖義;黃與路
• 申請（專利權）人: 右江民族醫學院
• 主分類號: C07J9/00
• 分類號: C07J9/00
• 代理公司: 南寧東之智專利代理有限公司 45128
• 代理人: 楊秋慧;汪治興

1.一種用超聲逆流結合生物酶從薏苡莖葉提取豆甾醇的方法，其特征在于：包括如下步驟：

(1)將薏苡莖或葉清洗干凈，破碎至40-100目，過篩，得薏苡粉，先將薏苡粉加入含有生石灰和硫代硫酸鈉的溶液浸泡30-60min，過濾，再將薏苡粉和水再放入超聲逆流提取罐，加入生物酶，在不同溫度下超聲逆流提取，過濾，得浸提液；所述生物酶由纖維素酶、果膠酶和木聚糖酶組成；

(2)浸提液再經過減壓濃縮，得浸膏，再將浸膏溶于加有氫氧化鈉和三聚磷酸鈉的有機溶劑，加熱至50-70℃皂化反應60-90min，得皂化產物；

(3)將皂化產物用PBS緩沖液和乙腈萃取，棄去水相，減壓濃縮回收乙腈，即得粗提物；

(4)將粗提物填充于聚丙烯酰胺凝膠柱層析，用洗脫劑洗脫，收集豆甾醇洗脫液，濃縮并回收洗脫液，得到的豆甾醇產物經過濾，結晶，即可得到豆甾醇產品；

所述生石灰和硫代硫酸鈉的質量比為2-4:1；其加入量為配成浸泡溶液質量濃度為3-5％；

所述超聲逆流提取在溫度為50-60℃超聲逆流提取1-2h?,升溫至65-70℃提取1?.0-1.5h，最后升溫至75-80℃提取0?.5-1?.0小時；

所述生物酶的加入量為薏苡粉重量的0?.5-1?.5％；

所述生物酶中纖維素酶、果膠酶和木聚糖酶的質量比為3-5:1-3:0?.5-1；

步驟(2)所述氫氧化鈉和三聚磷酸鈉的加入量分別是有機溶劑質量的10-15％和3-5％；

所述有機溶劑由體積比為1:3-5的四氫呋喃和乙醇組成。

2.根據權利要求1所述一種用超聲逆流結合生物酶從薏苡莖葉提取豆甾醇的方法，其特征在于：所述PBS緩沖液和乙腈的體積比為1:5-10。

3.根據權利要求1所述一種用超聲逆流結合生物酶從薏苡莖葉提取豆甾醇的方法，其特征在于：所述PBS緩沖液的pH為5?.8。

4.根據權利要求1所述一種用超聲逆流結合生物酶從薏苡莖葉提取豆甾醇的方法，其特征在于：所述洗脫劑由體積比為1:10-15的磷酸溶液和乙酸乙酯組成。