[發(fā)明專利]一種分泌鴨新型呼腸孤病毒σB蛋白單抗的雜交瘤細(xì)胞、單抗及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110323314.5
• 申請(qǐng)日: 2021-03-25
• 公開（公告）號(hào): CN112980802B
• 公開（公告）日: 2022-03-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 云濤;張存;華炯鋼;葉偉成;陳柳;倪征;朱寅初
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): C12N5/20
• 分類號(hào): C12N5/20;C07K16/10;G01N33/577;G01N33/569;G01N33/543;G01N33/68
• 代理公司: 杭州天勤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224
• 代理人: 沈金龍

1.一種分泌鴨新型呼腸孤病毒（novel duck reovirus）σB蛋白單抗的雜交瘤細(xì)胞，其特征在于，分類命名為雜交瘤細(xì)胞株NDRV YT 2-C10，保藏號(hào)為CCTCC NO：C202148。

2.一種鴨新型呼腸孤病毒σB蛋白單抗，其特征在于，由權(quán)利要求1所述雜交瘤細(xì)胞分泌。

3.權(quán)利要求2所述鴨新型呼腸孤病毒σB蛋白單抗在制備檢測鴨新型呼腸孤病毒的試劑盒中的應(yīng)用。

4.一種用于鴨新型呼腸孤病毒抗體阻斷ELISA檢測的試劑盒，其特征在于，包括：

（1）經(jīng)標(biāo)記物標(biāo)記的權(quán)利要求2所述鴨新型呼腸孤病毒σB蛋白單抗；

（2）鴨新型呼腸孤病毒σB蛋白。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于，標(biāo)記物為HRP或AP。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，其特征在于，還包括：封閉液、TMB底物顯色液、顯色終止液。

7.一種非疾病診斷為目的、用于鴨新型呼腸孤病毒抗體阻斷ELISA檢測的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）使用鴨新型呼腸孤病毒σB蛋白包被ELISA板，然后洗滌去除多余的鴨新型呼腸孤病毒σB蛋白；

（2）使用封閉液進(jìn)行封閉，封閉后洗滌去除多余封閉液；

（3）加入待測血清樣本孵育，孵育后洗滌去除待測血清樣本中未結(jié)合的物質(zhì)；

（4）加入經(jīng)HRP標(biāo)記的權(quán)利要求2所述鴨新型呼腸孤病毒σB蛋白單抗孵育，孵育后加入TMB底物顯色液進(jìn)行顯色；

（5）顯色后加入顯色終止液終止顯色，并用酶標(biāo)儀讀取ELISA板中各孔的OD450nm值；

（6）計(jì)算阻斷率PI，

PI=（1-被檢血清OD_{450 nm}/陰性血清OD_{450 nm}）×100%，

根據(jù)阻斷率值判斷待測血清樣本為鴨新型呼腸孤病毒陽性或陰性。