[發(fā)明專利]一種檢測漢灘型漢坦病毒的試劑盒及其檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110317175.5
• 申請日: 2021-03-25
• 公開（公告）號: CN112981007A
• 公開（公告）日: 2021-06-18
• 發(fā)明（設計）人: 張曉龍;慈穎;梁慧杰;劉瑩瑩;李穎;曹曉梅;馮進;楊艷
• 申請（專利權）人: 中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 北京華科聯(lián)合專利事務所(普通合伙) 11130
• 代理人: 王為

1.一種用于漢灘型漢坦病毒檢測的引物，其特征在于，包括以下引物組：

2.一種用于漢灘型漢坦病毒檢測的引物，其特征在于，包括以下引物組：

HAN-L-2F	CAGGTTGTTAGCTTTAAAC
HAN-L-2R	GGTCTTCTGTGTAGTATTG
HAN-M-4F	GTGTCTACTGAAGTTGAC
HAN-M-4R	AGGTCATAACAGGTTATTG

。

3.權利要求1所述的引物在制備漢灘型漢坦病毒檢測和基因分型試劑盒中的應用。

4.一種用于漢灘型漢坦病毒檢測的試劑盒，其特征在于，包含權利要求1或2所述的引物。

5.一種用于漢灘型漢坦病毒檢測的PCR試劑，其特征在于，所述PCR試劑包括如權利要求1或2所述的引物。

6.根據(jù)權利要求5所述的PCR試劑，其特征在于，包括以下成分：

7.一種用于漢灘型漢坦病毒的檢測方法，用于非診斷的目的，其特征在于，包括以下步驟：

1)、提取待測樣本RNA，使用商品化提取試劑盒，提取組織、細胞或血樣中的RNA，-80℃儲存?zhèn)溆茫?/p>

2)、以待測樣本RNA和cDNA為模板均可，檢測所用特異性引物和熒光探針序列如下：

不同模板反應體系組成及配制方法如下：

(1)以待測樣本RNA為模板反應體系如下：

試劑名稱	加入體積(μL)1×
TM XLT One-Step RT-qPCR ToughMix]]>	12.5
Fluorescein sodium salt(1μM)	2.5
HAN-L Assay(25×)FAM	2
HAN-M Assay(25×)HEX	1
β-actin Assay(25×)CY5	1
2O和待測RAN模板]]>	6
總體積	25μL

(2)以待測樣本cDNA為模板反應體系如下：

(3)上述體系配制完成后，加入Sapphire Chip中，每孔25μL，將芯片放入CrystalDigital PCR System中進行PCR擴增，反應條件如下：

(4)PCR反應完成后，將芯片取出，放置于NaicaTM prism微滴閱讀分析系統(tǒng)掃描芯片、分析數(shù)據(jù)。