[發明專利]一種青刺尖莖葉黃酮提取物的定性分析方法

有效

• 申請號: 202110309957.4
• 申請日: 2021-03-23
• 公開（公告）號: CN113063869B
• 公開（公告）日: 2022-11-18
• 發明（設計）人: 曲麗萍;周琪;王飛飛;馬驍;高紹陽;郭振宇
• 申請（專利權）人: 云南貝泰妮生物科技集團股份有限公司;上海貝泰妮生物科技有限公司;上海際研生物醫藥開發有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/34;G01N30/86;G01N30/88;G01N21/33
• 代理公司: 上海兆豐知識產權代理事務所(有限合伙) 31241
• 代理人: 盧艷民

本發明公開了一種青刺尖莖葉黃酮提取物的定性分析方法，充分挖掘青刺尖莖葉藥用資源，擴展了青刺果的藥用范圍，通過對青刺尖莖葉進行大孔吸附樹脂分離純化后，得到青刺尖莖葉黃酮提取物，并采用LC?MS/MS實現了該提取物中部分黃酮成分的定性，同時對其中的夏佛塔苷建立了方法學考察，該化合物為首次在青刺尖莖葉中發現，公開了一種青刺尖莖葉黃酮提取物中夏佛塔苷的定量分析方法，可實現其高效、準確的定量，該方法簡便易于推廣，可以實現青刺尖莖葉黃酮提取物的質量控制。

技術領域

本發明涉及化妝品技術領域，具體涉及一種青刺尖莖葉黃酮提取物的定性分析方法及其中夏佛塔苷的定量分析方法。

背景技術

青刺果(Prinsepia utilis Royle)為薔薇科扁核木屬植物青刺尖的果實，又名青那果、雞蛋果、阿那斯，產于云南、四川、西藏等省區交界地區，生于海拔2300～3200m的高寒冷涼山區。青刺果用途較廣，具有較高的營養和藥用價值。其根、葉、果均可入藥或食用，具有清熱、解毒、活血、消炎、健胃等作用，在云南少數民族有上千年的民間藥用及食用歷史。

現代藥理研究發現青刺果具有抗菌、抗氧化、降血脂、提高免疫力等藥理活性，其主要的化學成分為不飽和脂肪酸、三萜類、生物堿類、木質素類、黃酮類等[解仲伯,林華慶,余楚欽,王遠蘋.青刺果各類提取物的藥理作用研究進展,中成藥,2016,38(12):2651-2656；高凡丁,黃士淇,張成庭,蔡圣寶.發酵青刺果種子的酚類物質組成及抗氧化活性分析，云南民族大學學報:自然科學版,2018,27(3):167-175；Zhang Xuan,Jia Yijia,MaYanli,et al.Phenolic Composition,Antioxidant Properties,and Inhibition towardDigestive Enzymes with Molecular Docking Analysis of Different Fractions fromPrinsepia utilis Royle Fruits.2018,23(12):3373]。迄今為止，國內外對青刺果化學成分的研究主要集中在青刺果油，其具有良好的修復皮膚屏障的作用[和麗媛,王玲,呂俊梅.青刺果油研究進展，糧食科技與經濟,2019,44(7):145-148；夏海梅,何鵬飛,李艷萍,劉因華,趙遠,周志宏.青刺果油生物活性及應用研究概況,云南中醫中藥雜志,2018,39(12):86-87]，當前對其莖葉的研究較少，管斌對青刺尖進行了一系列研究[青刺尖化學成分及抗腫瘤活性研究青刺尖莖葉應用,上海交通大學,2013]，采用傳統柱色譜分離方法從青刺尖莖葉中分離鑒定了46個化合物，其中三萜及甾體類13個，且證實青刺尖中的三萜類化合物在治療腫瘤方面具有潛在的藥用價值。

夏佛塔苷具有通淋排石、清熱利濕、消水腫解血毒的功效[黃新凱,賴海標,鐘喨,黃智鋒,曾曄,吳松.尿石清合劑對下焦濕熱型尿路結石患者上尿路動力學的影響,海南醫學,2017,28(14):2288-2291]，目前沒有文獻報道過在青刺尖嫩葉中鑒定出夏佛塔苷。

已有專利技術對青刺尖嫩葉進行了提取制備，例如中國專利CN105982979B公開了一種青刺尖嫩葉提取物及其制備方法和應用，該專利對青刺尖嫩葉的超聲提取方式及皮膚外用劑的應用進行了保護。但是目前尚無文獻報道對青刺尖莖葉黃酮提取物進行成分鑒定，也沒有文獻對青刺尖莖葉黃酮提取物中夏佛塔苷的含量檢測方法進行研究。

發明內容

本發明的目的是克服現有技術缺陷，提供一種青刺尖莖葉黃酮提取物的定性分析方法，對青刺尖莖葉中黃酮成分進行了分離純化，紫外比色法確定了黃酮含量，不低于20％；并且采用LC-MS/MS方法對其莖葉黃酮成分進行了初步定性。

本發明的另外一個目的是提供一種青刺尖莖葉黃酮提取物中夏佛塔苷的定量分析方法。

實現上述目的一種技術方案是：一種青刺尖莖葉黃酮提取物的定性分析方法，包括以下步驟：