[發(fā)明專利]一種采用雙波長(zhǎng)一測(cè)多評(píng)法測(cè)定銀翹散中7種成分含量的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110307394.5
• 申請(qǐng)日: 2021-03-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113075314A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張會(huì)敏;宋健;李慶軍;曲新艷;鐘方曉;徐林
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東省中醫(yī)藥研究院
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 濟(jì)南泉城專利商標(biāo)事務(wù)所 37218
• 代理人: 李桂存

本發(fā)明公開(kāi)了一種采用雙波長(zhǎng)一測(cè)多評(píng)法測(cè)定銀翹散中7種成分含量的方法，分別取新綠原酸、綠原酸、連翹酯苷A、異綠原酸A、異綠原酸C、連翹苷、牛蒡苷為對(duì)照品，連翹酯苷A為內(nèi)參物，在237nm下，計(jì)算牛蒡苷和連翹苷的相對(duì)校正因子，在327nm下，計(jì)算新綠原酸、綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸C的相對(duì)校正因子，取連翹酯苷A對(duì)照品溶液和供試品溶液，注入高效液相色譜儀中，結(jié)合相對(duì)校正因子的計(jì)算銀翹散中7種成分含量連翹酯苷A、連翹苷、牛蒡苷、新綠原酸、綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸C 7種成分的含量。本發(fā)明建立了采用同一種供試品溶液，在兩個(gè)吸收波長(zhǎng)下，完成7個(gè)成分的含量測(cè)定，提高了檢測(cè)效率，降低了檢測(cè)成本。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥質(zhì)量控制與分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種采用雙波長(zhǎng)一測(cè)多評(píng)法測(cè)定銀翹散中7種成分含量的方法。

背景技術(shù)

中藥質(zhì)量是保障臨床用藥有效性和安全性的前提，是保證中藥發(fā)揮其療效的關(guān)鍵因素，也是中藥現(xiàn)代化、科學(xué)化的基本保障，因此提升中藥質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)對(duì)于提高中藥質(zhì)量尤為重要。中藥復(fù)方在臨床應(yīng)用上具有整體性、系統(tǒng)性，而采用單一的組分來(lái)評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量缺乏全面性。銀翹散作為治療溫病的代表性組方，具有辛涼解表、清熱解毒的功效，以治療風(fēng)溫、溫?zé)岵∫约澳承╇s病屬于邪在衛(wèi)分、上焦而聞名，在臨床上應(yīng)用廣泛。銀翹散由金銀花、連翹、薄荷、荊芥、桔梗、淡竹葉、牛蒡子、淡豆豉、甘草、蘆根10味中藥材組成，處方中以金銀花、連翹為君藥，且入藥量較大。目前HPLC單獨(dú)測(cè)定銀翹散中綠原酸、連翹苷、牛蒡苷的文獻(xiàn)報(bào)道較多，在2020版的《中國(guó)藥典》中，銀翹散僅以牛蒡苷為質(zhì)量控制指標(biāo)性成分，指標(biāo)單一，單一成分的含量測(cè)定難以表達(dá)銀翹散的物質(zhì)特征。

為了更好地控制銀翹散的質(zhì)量、確保臨床藥效，不使用過(guò)多價(jià)格昂貴的對(duì)照品、節(jié)約檢測(cè)成本，在2020版《中國(guó)藥典》的基礎(chǔ)上，提升銀翹散的質(zhì)量控質(zhì)方法具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的檢測(cè)銀翹散質(zhì)量控制指標(biāo)性成分單一，無(wú)法對(duì)處方中以金銀花、連翹為君藥成分進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)的問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種采用雙波長(zhǎng)一測(cè)多評(píng)法測(cè)定銀翹散中7種成分含量的方法，通過(guò)一測(cè)多評(píng)技術(shù)，選用連翹酯苷A作為內(nèi)參物，建立該成分與連翹苷、牛蒡苷、新綠原酸、綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸C的相對(duì)校正因子，得到銀翹散中7種成分的含量。

本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

一種采用雙波長(zhǎng)一測(cè)多評(píng)法測(cè)定銀翹散中7種成分含量的方法，包括以下步驟：

（1）對(duì)照品溶液的制備：分別取新綠原酸、綠原酸、連翹酯苷A、異綠原酸A、異綠原酸C、連翹苷、牛蒡苷對(duì)照品，以甲醇為溶劑，配置成濃度分別為1～10、50～150、200～350、20～100、5～20、20～40、50～150μg/ml的混合對(duì)照品溶液；

（2）供試品溶液的制備：稱取待測(cè)銀翹散0.4～0.6g，用30～100%甲醇水溶液定容，超聲10～40min，補(bǔ)足失重，濾膜過(guò)濾，得供試品溶液；

（3）相對(duì)校正因子的計(jì)算：取步驟（1）中的對(duì)照品溶液，注入高效色譜儀中，以連翹酯苷A為內(nèi)參物，在檢測(cè)波長(zhǎng)為237nm下，分別計(jì)算牛蒡苷和連翹苷的相對(duì)校正因子?_k/m；在檢測(cè)波長(zhǎng)為327nm下，分別計(jì)算新綠原酸、綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸C的相對(duì)校正因子?_k/m；

相對(duì)校正因子計(jì)算公式如下：

；

其中，A_k是內(nèi)參物對(duì)照品的峰面積；W_k是內(nèi)參物對(duì)照品的濃度；A_m是其它對(duì)照品的峰面積；W_m是其它對(duì)照品的質(zhì)量濃度；