[發明專利]一種用于檢測β-乳球蛋白的膠體金免疫層析試紙及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202110306432.5
• 申請日: 2021-03-23
• 公開（公告）號: CN113030486A
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發明（設計）人: 薛海燕;宋宏新;賀寶元;韓晶晶;張思冉;伊美霞
• 申請（專利權）人: 陜西科技大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/531;G01N33/532;C07K16/18
• 代理公司: 西安合創非凡知識產權代理事務所(普通合伙) 61248
• 代理人: 于波

本發明公開了一種用于檢測β?乳球蛋白的膠體金免疫層析試紙及其制備方法和應用，所述試紙包括金標墊、樣品墊、吸水墊和NC膜，所述金標墊中含有膠體金標記的鼠抗牛β?乳球蛋白單克隆抗體，所述NC膜上設置有T檢測線和C質控線。本發明的膠體金免疫層析試紙具有操作簡單、成本低、攜帶方便、方便快速、靈敏度高等優點，檢測過程不需要專業技術，任何人都可以現場操作，應用前景廣泛。

技術領域

本發明涉及乳品檢測技術領域，具體涉及一種用于檢測β-乳球蛋白的膠體金免疫層析試紙及其制備方法和應用。

背景技術

營養學研究表明，羊乳及其制品具有營養豐富、易吸收、不易導致過敏等優點。近年來羊乳產業不斷發展，已成為我國乳業的重要組成部分。但是我國奶羊場規模小，奶羊生長慢，泌乳期短，產乳量少，且極易受季節的影響，因此羊乳資源相對匱乏，市場價格較高。由于牛乳在外觀、營養成分上與羊乳極為相似，所以市場中存在羊乳中摻入牛乳來降低生產成本，達到盈利目的現象。這種行為不僅擾亂經濟秩序，欺騙消費者，更損害了牛乳過敏者的身心健康。為了保證羊乳產品的質量，維護消費者利益，急需建立一種能夠現場檢測羊乳中是否摻入牛乳的快速檢驗方法。

而目前的檢驗方法有非免疫學方法和免疫學方法，非免疫學方法包括色譜技術、電泳技術、聚合酶鏈式反應（PCR）技術，檢測過程耗時較長，對技術人員和機器設備要求高，檢測成本高，不易普及；免疫學方法能夠克服非免疫學方法的不足，如酶聯免疫吸附（ELISA）法和膠體金免疫層析技術等，但是現有的檢測方法最低檢測線高、準確度低限制了其推廣應用。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提供一種用于檢測β-乳球蛋白的膠體金免疫層析試紙及其制備方法和應用。

本發明采用膠體金免疫層析試紙制備試紙條，該試紙條包括樣品墊、金標墊、NC膜和吸水墊；其中金標墊中含有膠體金標記的鼠抗牛β-乳球蛋白單克隆抗體，NC膜上設置有T檢測線和C質控線，其中T檢測線噴涂有鼠抗牛β-乳球蛋白單克隆抗體，C質控線噴涂有羊抗鼠IgG的抗體。

本發明采用的技術方案之一為：

一種用于檢測β-乳球蛋白的膠體金免疫層析試紙，所述試紙包括金標墊、樣品墊、吸水墊和NC膜，所述金標墊中含有膠體金標記的鼠抗牛β-乳球蛋白單克隆抗體，所述金標記的鼠抗牛β-乳球蛋白單克隆抗體以鼠抗牛β-乳球蛋白單克隆抗體量記為0.25μg/cm²，所述NC膜上設置有T檢測線，所述T檢測線上鼠抗牛β-乳球蛋白單克隆抗體以牛β-乳球蛋白單克隆抗體量計為0.00625μg/cm²。

進一步地，所述NC膜上還設置有C質控線，所述C質控線上含有羊抗鼠IgG的抗體，所述C質控線上羊抗鼠IgG的抗體以羊抗鼠IgG抗體量計為0.00625μg/cm²。

本發明采用的技術方案之二為：

一種本發明所述膠體金免疫層析試紙的制備方法，包括：

S1：將膠體金標記的鼠抗牛β-乳球蛋白單克隆抗體溶液噴涂至金標墊上；

S2：將鼠抗牛β-乳球蛋白單克隆抗體溶液噴涂至NC膜的T檢測線上；

S3：將羊抗鼠IgG抗體溶液噴涂至NC膜的C質控線上；

S4：將金標墊、樣品墊、吸水墊、NC膜組裝成試紙；

所述金標墊上膠體金標記的鼠抗牛β-乳球蛋白單克隆抗體以鼠抗牛β-乳球蛋白單克隆抗體量記為0.25μg/cm²；

所述T檢測線上鼠抗牛β-乳球蛋白單克隆抗體以牛β-乳球蛋白單克隆抗體量計為0.00625μg/cm²；

所述C質控線上羊抗鼠IgG的抗體以羊抗鼠IgG抗體量計為0.00625μg/cm²。

進一步地，本發明一個實施例中，包括：

S5：鼠抗牛β-乳球蛋白單克隆抗體的制備及純化；