[發(fā)明專利]一種用于檢測類鼻疽伯克霍爾德菌的組合物及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110306283.2 | 申請日： | 2021-03-23 |
| 公開（公告）號： | CN113046452B | 公開（公告）日： | 2022-02-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 李倩;楊文波;鄧鈴;閆晶敏;饒承龍;王施偉;毛旭虎 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué) |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 重慶志合專利事務(wù)所(普通合伙) 50210 | 代理人： | 胡榮琿 |
| 地址： | 400038 重*** | 國省代碼： | 重慶;50 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 用于 檢測 鼻疽 霍爾 組合 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種組合物在制備用于檢測類鼻疽伯克霍爾德菌感染的診斷試劑盒中的應(yīng)用，其特征在于，所述組合物包含用于特異性擴增類鼻疽伯克霍爾德菌Ⅵ型分泌系統(tǒng)BPSS0109基因的引物對，該引物對能夠區(qū)分類鼻疽伯克霍爾德菌和泰國伯克霍爾德菌；
所述引物對擴增得到的靶基因的核苷酸序列為SEQ ID NO:4；
所述引物對的上游引物的核苷酸序列為SEQ ID NO:1，下游引物的核苷酸序列為SEQID NO:2；
所述試劑盒包含用于檢測靶基因濃度的探針，所述探針結(jié)合有熒光報告基團。
2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述探針的5’端標記有熒光報告基團，3’端標記淬滅基團。
3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述探針的熒光報告基團為FAM，所述淬滅基團為BHQ1。
4.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述探針的核苷酸序列為SEQ ID NO:3。
5.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述試劑盒還包含DNA聚合酶溶液、dNTP溶液、MgCl2溶液中的一種或多種。
6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述dNTP溶液中含有dUTP、dATP、dCTP、dGTP和dTTP。
7.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述dNTP溶液中dATP、dCTP和dGTP的濃度均為500μM，dTTP及dUTP的濃度均為250μM。
8.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述DNA聚合酶溶液中含有UNG酶。
9.如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述UNG酶的濃度為0.2U/25μL。
10. 如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述DNA聚合酶為Taq DNA聚合酶，其濃度為1U/25μL。
11. 如權(quán)利要求5-10中任一項所述的應(yīng)用，其特征在于，該試劑盒通過實時熒光定量PCR實現(xiàn)BPSS0109基因的擴增。
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