[發明專利]一種抗凍蛋白及其制備方法和應用在審
| 申請號: | 202110295775.6 | 申請日: | 2021-03-19 |
| 公開(公告)號: | CN112876545A | 公開(公告)日: | 2021-06-01 |
| 發明(設計)人: | 廖麗;高山惠;陳波;胥義 | 申請(專利權)人: | 中國極地研究中心(中國極地研究所);上海理工大學 |
| 主分類號: | C07K14/195 | 分類號: | C07K14/195;C12N15/70;C12N1/21;A23L3/3526;C12R1/19 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 200136 *** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 蛋白 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種抗凍蛋白,其特征在于,所述抗凍蛋白為由如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列組成的蛋白質,或在SEQ ID No.1所示的氨基酸序列中經取代、缺失或插入一個或多個氨基酸所獲得的具有同等活性的蛋白質。
2.如權利要求1所述的抗凍蛋白,其特征在于,所述抗凍蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNo.3所示。
3.一種如權利要求1所述的抗凍蛋白的編碼基因,其特征在于,所述編碼基因包含核心序列,所述核心序列的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
4.如權利要求3所述的抗凍蛋白的編碼基因,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ IDNo.4所示。
5.如權利要求1或2所述的抗凍蛋白的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)將核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的基因片段克隆到pET42a載體中,得到重組質粒;
(2)將重組質粒轉入大腸桿菌宿主中,誘導表達,分離獲得所述的抗凍蛋白。
6.如權利要求5所述的抗凍蛋白的制備方法,其特征在于,宿主細胞為E. coli BL21、E. coli Rosetta、E. coli BL21 plysS。
7.如權利要求5所述的抗凍蛋白的制備方法,其特征在于,誘導表達的條件為:25℃下添加1mM IPTG誘導表達12小時。
8.如權利要求1或2所述的抗凍蛋白在制備低溫保護劑中的應用。
9.如權利要求1或2所述的抗凍蛋白在食品低溫保存中的應用。
10.如權利要求1或2所述的抗凍蛋白在生物醫學樣品低溫保存中的應用。
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