[發明專利]一種OXLD1基因過表達的細胞株及其構建方法有效
| 申請號: | 202110295366.6 | 申請日: | 2021-03-19 |
| 公開(公告)號: | CN113201498B | 公開(公告)日: | 2023-06-13 |
| 發明(設計)人: | 閆妍;趙曉靜;崔賽嘉;陳卉寧;韓洋;田留洋 | 申請(專利權)人: | 中國人民解放軍總醫院 |
| 主分類號: | C12N5/10 | 分類號: | C12N5/10;C12N15/12;C12N15/85;C12N15/66 |
| 代理公司: | 北京領科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11690 | 代理人: | 徐丹丹;張丹 |
| 地址: | 100039*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 oxld1 基因 表達 細胞株 及其 構建 方法 | ||
1.一種OXLD1基因過表達的細胞株的應用,其特征在于,所述的OXLD1基因過表達的細胞株的染色體上包含OXLD1基因,所述的OXLD1基因來源于大鼠,所述的OXLD1基因的核苷酸序列如NM_001305985.1所示,所述的細胞株為大鼠心肌細胞系H9C2細胞;
所述的應用為增加常氧條件下的細胞的氧消耗速率。
2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述的OXLD1基因過表達的細胞株的構建方法包括:
a)構建包含OXLD1基因的過表達載體;
b)將步驟a)所述的過表達載體轉染至H9C2細胞;
c)抗性篩選獲得OXLD1基因過表達的細胞株;
其中,所述的過表達載體中包含SEQ?ID?NO:1。
3.根據權利要求2所述的應用,其特征在于,所述的構建方法包括:
a)構建包含OXLD1基因的過表達載體,將過表達載體轉化至感受態細菌,培養并提取過表達載體的質粒;
b)將步驟a)獲得的過表達載體的質粒與脂質體混合制備脂質體-DNA復合物,與H9C2細胞共孵育;
c)抗性篩選獲得OXLD1基因過表達的細胞株。
4.根據權利要求2或3所述的應用,其特征在于,所述的過表達載體還包含載體骨架,所述的載體骨架為慢病毒載體骨架。
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