[發(fā)明專利]一種游離甲狀腺素檢測試劑條的樣本墊處理試劑

有效

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• 申請日: 2021-03-18
• 公開（公告）號: CN113281526B
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發(fā)明（設計）人: 王森;楊蓉;楊清剛
• 申請（專利權）人: 杭州微策生物技術股份有限公司
• 主分類號: G01N33/78
• 分類號: G01N33/78;G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 杭州天昊專利代理事務所(特殊普通合伙) 33283
• 代理人: 向慶寧;曹小燕

本發(fā)明提供了一種新的游離甲狀腺素檢測試劑條的樣本墊處理試劑，通過采用特定分子量和含量的高聚物脲醛樹脂，配制得到的樣本墊處理液，可以使待測樣本中的游離甲狀腺素被完全分離，經其處理的樣本墊，并進一步制得的游離甲狀腺素檢測試劑條，用于競爭法檢測游離甲狀腺素，可使游離甲狀腺素被充分捕捉，充分反應，大幅提高游離甲狀腺素的檢測靈敏度，檢測靈敏度達到10pg/ml，滿足臨床檢測需求。同時還提供了脲醛樹脂用于制備游離甲狀腺素檢測試劑條或游離甲狀腺素檢測試劑條的樣本墊處理試劑的用途。

技術領域

本發(fā)明屬于生物檢測技術領域，涉及一種免疫層析檢測試劑條，尤其涉及一種游離甲狀腺素檢測試劑條的樣本墊處理試劑。

背景技術

熒光免疫層析技術作為一種最常用的POCT技術，具有操作簡便，反應速度快，儀器需求小等特點，一般的，檢測試劑條由樣品墊，結合墊(含標記抗體)，NC膜(含包被抗體/抗原的T線和C線)，吸水墊等組成。測試時，樣品加入樣品墊中，流入結合墊，水化結合墊的標記抗體，然后在NC膜上流動至檢測線T線和C線，根據T/C的信號值來計算樣本中被測物的濃度，一般來說C線信號是趨于穩(wěn)定的，作為控制措施降低試劑條之間的差異，在進行檢測試劑條評估時，一般用T線的信號值作為判斷依據。

游離甲狀腺素(簡稱游離T4，或FT4)作為一種檢測甲狀腺功能的標志物，當前主要使用化學發(fā)光檢測(如CN102095881A、CN101551389A等)，市面上沒有使用熒光免疫層析技術進行游離甲狀腺素檢測的產品，主要原因是游離T4在熒光免疫層析的過程中無法充分被捕捉，造成反應不充分，進而導致靈敏度低。

一般的，檢測試劑條的樣品墊與結合墊都需要預處理，但是使用常規(guī)處理樣品墊的試劑處理的樣品墊，僅可以檢測100pg/mL的游離T4，而游離T4作為甲狀腺功能檢測的重要指標，正常值范圍在8-15pg/mL，所以100pg/mL的檢測靈敏度，無法滿足目前的需求，檢測時必須考慮更高的靈敏度。

因此急需開發(fā)更適用于游離甲狀腺素檢測的熒光免疫層析技術，并提高其檢測靈敏度，從而實現更簡便快捷、高準確性的游離甲狀腺素的現場快速檢測。

發(fā)明內容

為彌補已有技術的缺陷，本發(fā)明提供了一種新的游離甲狀腺素檢測試劑條的樣本墊處理試劑，通過采用特定分子量和含量的高聚物脲醛樹脂，配制得到的樣本墊處理液，可以使待測樣本中的游離甲狀腺素被更好地分離，經其處理的樣本墊，并進一步制得的游離甲狀腺素檢測試劑條，用于競爭法檢測游離甲狀腺素，可使游離甲狀腺素被充分捕捉，充分反應，大幅提高游離甲狀腺素的檢測靈敏度，滿足臨床檢測需求。

一方面，本發(fā)明提供了一種游離甲狀腺素檢測試劑條的樣本墊處理試劑，所述試劑含有脲醛樹脂。

在免疫層析檢測裝置中，常規(guī)的樣品墊處理液一般包括體系緩沖液、蛋白質、高聚物、鹽離子和表面活性劑，其中的高聚物大多采用PVP-k30等非離子型高分子化合物，但其用于游離甲狀腺素檢測時，并不能使游離甲狀腺素與待測血液樣本中的其他雜質很好地分離，從而難以實現準確檢測。

本研究小組經過大量實驗，令人驚喜地發(fā)現，采用脲醛樹脂作為高聚物配制的樣本墊處理試劑，從而制得的試劑條，能大幅提升游離甲狀腺素的檢測靈敏度。這可能是因為脲醛樹脂的加入使液體粘度變大，樣品在樣本墊上層析速度變慢，游離甲狀腺素被更好地分離，使抗體更容易捕捉到游離甲狀腺素，使游離甲狀腺素更容易被結合，抗原抗體反應更加充分。

進一步地，所述脲醛樹脂的分子量為10000-20000。

進一步地，所述脲醛樹脂的含量為1％～2％。

研究證明，脲醛樹脂濃度越大，分子量越大，液體越粘稠，但過于黏稠的溶液在檢測時層析速度過慢，會使檢測時間過長，反而影響檢測靈敏度。因此必須選擇合適的分子量和濃度。通過篩選選擇了分子量10000和20000兩種分子量的脲醛樹脂，濃度分別為1％和2％。