[發明專利]一種純化豬輪狀病毒的方法及其應用在審
| 申請號： | 202110291568.3 | 申請日： | 2021-03-18 |
| 公開（公告）號： | CN113073087A | 公開（公告）日： | 2021-07-06 |
| 發明（設計）人： | 周明光;張華偉;周飛燕;徐高原;羅修鑫;陳映瑾;余蕾;湯細彪 | 申請（專利權）人： | 武漢科前生物股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N7/02 | 分類號： | C12N7/02 |
| 代理公司： | 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 | 代理人： | 錢云 |
| 地址： | 430206 湖北省武*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 純化 輪狀病毒 方法 及其 應用 | ||
1.一種純化豬輪狀病毒的方法，其特征在于，包括：
取片狀載體培養的豬輪狀病毒液作為待純化病毒液；
對所述待純化病毒液進行膜包濃縮和離子交換層析；
所述膜包濃縮包括如下流程：
使用100～300KD膜包將所述待純化病毒液濃縮至起始體積的1/5～1/10，后補加緩沖液并濃縮至所述起始體積的1/10～1/20，再次補加緩沖液濃縮至所述起始體積的1/20～1/40。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述100～300KD膜包在使用前經過如下預處理流程：
使用堿溶液對所述100～300KD膜包進行循環滅菌處理，再通過無菌注射水清洗所述100～300KD膜包至pH為6.8～7.2。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，還包括，在所述膜包濃縮后，使用所述起始體積1/20～1/40的緩沖液沖洗膜包，收集洗膜液。
4.根據權利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，所述緩沖液為0.01～0.02mol/L的PB溶液。
5.根據權利要求1-4任一項所述的方法，其特征在于，所述離子交換層析的介質為QFocurose 6FF。
6.根據權利要求1-5任一項所述的方法，其特征在于，所述離子交換層析的洗脫液包括：含0.2～0.3mol/L的NaCl的PBS，所述PBS的濃度為0.01～0.02mol/L。
7.根據權利要求1-6任一項所述的方法，其特征在于，所述離子交換層析過程中，pH保持在8.0～8.1，和/或，病毒濃縮液上樣的線性流速為50～60cm/h，和/或，壓力小于2.5bar。
8.權利要求1-7任一項所述方法在制備用于免疫豬輪狀病毒的藥物中的應用。
9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述藥物為疫苗。
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