[發明專利]一種抗體或其抗原結合片段及其制備方法和用途

在審

• 申請號: 202110286277.5
• 申請日: 2021-03-17
• 公開（公告）號: CN115109153A
• 公開（公告）日: 2022-09-27
• 發明（設計）人: 廖軍;楊雪梅;張衡;何俊;劉恒;李毅;徐海譯;付優;陳達川
• 申請（專利權）人: 上海科技大學
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;C12P21/02;A61K39/395;A61P35/00;A61P1/00;A61P11/00;A61P31/14;A61P31/04;A61P33/06
• 代理公司: 上海光華專利事務所(普通合伙) 31219
• 代理人: 嚴晨;許亦琳

本發明涉及生物技術領域，特別是涉及一種抗體或其抗原結合片段及其制備方法和用途。本發明所提供的抗體或其抗原結合片段可以結合于CD147，其中，所述抗體或其抗原結合片段的結合抗原表位包括CD147的Ala149、Asp136或Asp136的糖基化修飾、Tyr140或Tyr140的糖基化修飾、Gln195或Gln195的糖基化修飾、Asp194或Asp194的糖基化修飾、Pro104、Asp147或Asp147的糖基化修飾、Ser193或Ser193的糖基化修飾、Lys191或Lys191的糖基化修飾、Gly192。本發明所提供的抗體或其抗原結合片段，對于MCT1/CD147具有很高的親和力。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，特別是涉及一種抗體或其抗原結合片段及其制備方法和用途。

背景技術

腫瘤代謝具有異質性和Warburg effect。在遠離灌注血管的地方，低氧環境中的腫瘤細胞依靠糖酵解來維持生存和增殖。ATP和中間代謝產物的供給取決于葡萄糖的高利用率，代謝產物乳酸的釋放由MCT4參與完成。相比之下，盡管氧充足的腫瘤細胞也表達葡萄糖轉運蛋白(GLUT)，但氧充足的腫瘤細胞對丙酮酸代謝偏好較高。MCT1將低氧腫瘤細胞釋放的乳酸轉運到氧充足的腫瘤細胞中，乳酸由乳酸脫氫酶氧化為丙酮酸并參與三羧酸(TCA)循環。氧化型腫瘤細胞對乳酸的代謝偏好使低氧型腫瘤細胞獲得更多的葡萄糖。這種代謝協同性是體內低氧條件下腫瘤細胞存活的關鍵。因此MCT1和MCT4是偶聯的腫瘤治療靶點。

在多種癌組織中，CD147(細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子)除了可以協助MCT1/MCT4和GLUT1表達在癌細胞質膜以外，還可以充當內皮細胞中血管內皮生長因子2的共受體，增強血管內皮生長因子介導的信號傳導，促進癌組織中的血管生成。目前研究發現，MCT1/4介導的乳酸傳遞，在腫瘤生長過程中發揮重要的作用，針對MCT1/4的小分子抑制劑AZD3965和7ACC2在臨床實驗和臨床前實驗中。但AZD3965和7ACC2只能高效針對MCT1，低效抑制MCT4，因此療效受限。此外，一些正常的組織和細胞盡管不高表達CD147，但高表達MCT1或MCT4。這些組織和細胞將由于MCT1或MCT4的活性和功能受到AZD3965和7ACC2的抑制而受到損害。作為MCT1和MCT4的分子伴侶，CD147促進了MCT1和MCT4的質膜定位，在腫瘤生長侵襲和血管生成等過程中起到關鍵的作用，因此針對CD147的抑制型抗體將有潛力發展為治療顱外實體瘤的藥物。

而從結構上已得知CD147由一個單次跨膜結構域和由兩個或三個IgG domain的胞外結構域組成，這種結構不利于小分子抑制劑的研發。

發明內容

鑒于上述現有小分子藥物技術的缺點，本發明的目的在于提供一種抗體或其抗原結合片段及其制備方法和用途，用于解決現有技術中的問題。

為實現上述目的及其他相關目的，本發明一方面提供一種抗體或其抗原結合片段，所述抗體或其抗原結合片段可以結合于CD147，其中，所述抗體或其抗原結合片段的結合抗原表位包括CD147的Ala149、Asp136或Asp136的糖基化修飾、Tyr140或Tyr140的糖基化修飾、Gln195或Gln195的糖基化修飾、Asp194或Asp194的糖基化修飾、Pro104、Asp147或Asp147的糖基化修飾、Ser193或Ser193的糖基化修飾、Lys191或Lys191的糖基化修飾、Gly192。

本發明另一方面提供一種分離的多核苷酸，編碼上述的抗體或其抗原結合片段。

本發明另一方面提供一種構建體，含有上述的分離的多核苷酸。

本發明另一方面提供一種抗體的表達系統，所述表達系統含有上述的構建體或基因組中整合有外源的上述的多核苷酸。

本發明另一方面提供上述的抗體或其抗原結合片段的制備方法，包括如下步驟：在適合表達所述抗體的條件下，培養上述的抗體的表達系統，從而表達出所述的抗體或其抗原結合片段，純化分離出所述的抗體或其抗原結合片段。