[發(fā)明專利]一種抗糖化的膠原蛋白肽及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110285551.7 | 申請日： | 2021-03-17 |
| 公開（公告）號： | CN113024662B | 公開（公告）日： | 2023-04-07 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王海燕;劉愛青;閆征 | 申請（專利權(quán)）人： | 北京盛美諾生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/78 | 分類號： | C07K14/78;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/18;C07K1/16;C07K1/14;C07K1/36 |
| 代理公司： | 合肥正則元起專利代理事務(wù)所(普通合伙) 34160 | 代理人： | 劉念 |
| 地址： | 100000 北京市東城區(qū)*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 糖化 膠原 蛋白 及其 制備 方法 | ||
1.一種抗糖化的膠原蛋白肽，其特征在于：由如下步驟制成：
步驟S1總蛋白粗提物的制備；
步驟S2膠原蛋白粗提物的制備；
步驟S3膠原蛋白粗提物的精制；
步驟S4膠原蛋白肽的制備；
步驟S5抗糖化膠原蛋白肽的制備；
具體包括如下步驟：
步驟S1總蛋白粗提物的制備：稱取原料加入氫氧化鈉溶液浸泡2-4h，清洗2-3次，加入軟化水，在研磨機(jī)中勻漿至糊狀，制得總蛋白粗提物；
步驟S2膠原蛋白粗提物的制備：將總蛋白粗提物調(diào)整pH值為2-4，加熱至75-90℃，保溫提膠3-8h，制得膠原蛋白粗提物；
步驟S3膠原蛋白粗提物的精制：將澄清劑加入膠原蛋白粗提物中，調(diào)整pH值為2-7，攪拌均勻后靜置2-8h，制得膠原蛋白精制物；
步驟S4膠原蛋白肽的制備：將膠原蛋白精制物調(diào)節(jié)pH值為5-8，加入復(fù)合蛋白酶酶解,在溫度為45-60℃的條件下，酶解2-6h，得到酶解液；
步驟S5抗糖化膠原蛋白肽的制備：將酶解液采用2KD超濾膜過濾，再通過納濾去除無機(jī)鹽和水溶性游離氨基酸，噴霧干燥后得到膠原蛋白肽；將膠原蛋白肽經(jīng)離子交換樹脂、凝膠柱層析純化后，通過熒光檢測糖化抑制率，得到抗糖化膠原蛋白肽；
步驟S3所述的澄清劑為秋葵膠，仙草膠，瓜爾豆膠以質(zhì)量比1:1-3:2-6混合并靜置4-6h，澄清劑的加入量為膠原蛋白粗提物質(zhì)量的0.1-2％，澄清劑的pH值為2-4；
步驟S1所述的原料為羅非魚皮；
步驟S4所述的復(fù)合蛋白酶為堿性蛋白酶和風(fēng)味酶組合，兩種酶質(zhì)量比為5:2，組合酶的加入量為膠原蛋白精制物質(zhì)量的0.4％-1％，酶解pH值為7.5-8.0。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗糖化的膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于：氫氧化鈉溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5％。
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