[發明專利]一種抗糖化的膠原蛋白肽及其制備方法

有效

• 申請號: 202110285551.7
• 申請日: 2021-03-17
• 公開（公告）號: CN113024662B
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 王海燕;劉愛青;閆征
• 申請（專利權）人: 北京盛美諾生物技術有限公司
• 主分類號: C07K14/78
• 分類號: C07K14/78;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/18;C07K1/16;C07K1/14;C07K1/36
• 代理公司: 合肥正則元起專利代理事務所(普通合伙) 34160
• 代理人: 劉念

本發明公開了一種抗糖化的膠原蛋白肽及其制備方法，該抗糖化的膠原蛋白肽由如下步驟制成：步驟S1總蛋白粗提物的制備；步驟S2膠原蛋白粗提物的制備；步驟S3膠原蛋白粗提物的精制；步驟S4膠原蛋白肽的制備；步驟S5抗糖化膠原蛋白肽的制備；本發明制備的抗糖化的膠原蛋白肽富含G?l?y?Hyp?Pro?G?l?y?Arg?Pro?G?l?y?Hyp序列，分子量范圍在850?1800道爾頓之間，具有安全無毒副作用，易于消化，抗糖化，可以作為藥品、保健食品和食品的原料，并且能夠添加至酸性飲料中，能夠用于改善皮膚水分皺并改善血管彈性。

技術領域

本發明涉及多肽合成技術領域，具體涉及一種抗糖化的膠原蛋白肽及其制備方法。

背景技術

20世紀，人類平均壽命增加了30年，老化引起了研究者的巨大興趣。老化是一種復雜的過程，有多種機制參與，包括基因組突變的累積，有毒代謝產物的堆積、激素減少及糖化導致的大分子交聯等。糖化反應是一種發生于游離氨基和還原糖之間的非酶促反應，即蛋白質的糖基化反應。這一反應能夠產生糖化終末產物(advancedglycationendproducts,AGE),如羧甲基賴氨酸，羧乙基賴氨酸，糖基化膠原等。由于皮膚組織真皮細胞外機質中的膠原蛋白可逆轉性低，更容易與葡萄糖等代謝分子發生非酶促反應生成AGEs，對組織產生一系列不良影響，因此推測糖化在老化中發揮重要作用。

膠原蛋白肽是將大分子膠原蛋白經酶解后制成的小分子肽類產品。據研究報道，膠原蛋白肽有提高皮膚水分、減少皺紋，抗衰老等作用，但是沒有關于抗糖化膠原蛋白肽的報道。

本專利試圖制備一種對皮膚抗糖化起作用的膠原蛋白肽，使之能延緩組織老化，尤其對有助于糖尿病人皮膚護理和治療。

發明內容

本發明的目的在于提供一種抗糖化的膠原蛋白肽及其制備方法。

本發明要解決的技術問題：

現有的膠原蛋白肽抗糖化效果差，不利于延緩皮膚衰老、改善血管彈性、以及糖尿病人皮膚護理和治療。

本發明的目的可以通過以下技術方案實現：

一種抗糖化的膠原蛋白肽，由如下步驟制成：

步驟S1總蛋白粗提物的制備：稱取原料加入氫氧化鈉溶液浸泡2-4h，清洗2-3次，加入軟化水，在研磨機中勻漿至糊狀，制得總蛋白粗提物；

步驟S2膠原蛋白粗提物的制備：將總蛋白粗提物調整pH值為2-4，加熱至75-90℃，保溫提膠3-8h，制得膠原蛋白粗提物；

步驟S3膠原蛋白粗提物的精制：將澄清劑加入膠原蛋白粗提物中，調整pH值為2-7，攪拌均勻后靜置2-8h，制得膠原蛋白精制物；

步驟S4膠原蛋白肽的制備：將膠原蛋白精制物調節pH值為5-8，加入復合蛋白酶酶解,在溫度為45-60℃的條件下，酶解2-6h，得到酶解液；

步驟S5抗糖化膠原蛋白肽的制備：將酶解液采用2KD超濾膜過濾，再通過納濾去除無機鹽和水溶性游離氨基酸，噴霧干燥后得到膠原蛋白肽；將膠原蛋白肽經離子交換樹脂、凝膠柱層析純化后，通過熒光檢測糖化抑制率，得到抗糖化膠原蛋白肽。

進一步，步驟S1所述的原料為動物的皮、鱗或骨中的一種，氫氧化鈉溶液的質量分數為0.5％。

進一步，步驟S3所述的澄清劑為秋葵膠，仙草膠，瓜爾豆膠以質量比1:1-3:2-6混合并靜置4-6h，澄清劑的加入量為膠原蛋白粗提物質量的0.1-2％，澄清劑的pH值為2-4。

進一步，步驟S4所述的復合蛋白酶為堿性蛋白酶和風味酶組合，兩種酶質量比為5:2，組合酶的加入量為膠原蛋白精制物質量的0.4％-1％，酶解pH值為7.5-8.0。

所述酶解溫度為50-60℃，酶解時間為4-6h。