[發明專利]一種用于根系分泌物原位可視化檢測的熒光印跡膜及其制備與應用

有效

• 申請號: 202110279659.5
• 申請日: 2021-03-16
• 公開（公告）號: CN113292749B
• 公開（公告）日: 2022-07-05
• 發明（設計）人: 蔣剛彪;藍玲敏;胡甜;李偉雄;吳官平
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C08J5/18
• 分類號: C08J5/18
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 殷妹

本發明公開了一種用于根系分泌物原位可視化檢測的熒光印跡膜及其制備與應用。本發明以碲化鎘量子點為熒光檢測源，將其包合于以單一植物根系分泌物為模板、氨丙基硅氧烷、苯基硅氧烷、交聯劑的分子印跡聚合物中，最后負載于凝膠膜上，制得成原位可視化特異性檢測綠原酸的熒光印跡膜。所得熒光印跡膜可原位可視化檢測分泌物植物根系分泌物，能夠在復雜的體系中只對特定分泌物進行特異性響應，且特異性響應值高，安全無毒，可重復利用。

技術領域

本發明屬于能源化工領域(包括化學、材料科學、能源科學與技術、化學工程、紡織科學技術、食品科學技術、環境科學技術、安全科學技術等)領域，具體涉及一種用于根系分泌物原位可視化檢測的熒光印跡膜及其制備與應用。

背景技術

根系分泌物是根系高效活化土壤養分的主要成分，對提高根際土壤養分的有效性意義重大，并且強烈影響著土壤微生物的種類、數量及其在植物根際的分布，研究根系分泌物以及其和土壤微生物關系一直是科學界的重點和難點。但是，土壤中根系分泌物的分解、根系分泌物本身含量低、成分復雜以及土壤環境帶來的干擾，給研究帶來了很大的困難。

目前，研究根系分泌物的方法大多是先收集提純后檢測，通常是通過構建采集系統收集根系分泌物，由于收集時是從根系部位用溶劑洗脫下來，損失嚴重、準確性差，對微量分泌物而言，先洗脫、再從洗脫液中分離純化困難重重，此外容易對根系造成擾動，而且難以知道特定分泌物的具體分泌部位和分泌數量。因此，急切地需要發明一種在根系原位進行特異性檢測根系分泌物的方法來檢測根系分泌物的具體分泌部位和分泌量。

現有的檢測方法均為原位收集根系分泌物，再對分泌物進行分離檢測，雖然實現了原位收集植物分泌物，能夠減少對植物的傷害，較傳統的分泌物收集方式而言，對植物分泌物的鑒定更加準確、快速，但是仍然沒有達到原位檢測的功能，還是存在使用傳統柱色譜等檢測繁瑣性的缺點，收集后的多種根系分泌物混雜在一起，仍然需要通過柱色譜等操作才能進行分離檢測，步驟繁瑣，不能節省時間。同時，原位收集裝置部件較多，組裝不方便，并且儀器裝置成本較高，需要一定的實驗空間安置收集與檢測的儀器設備，不能實現對根系分泌物的檢測實現快速、便捷。

綜上，目前實現原位可視化是根系分泌物檢測領域的一個重點難點，沒有較為簡便敏銳的檢測手段，根系分泌物將在提取純化過程中造成損失并對根系造成不可逆的傷害。

發明內容

為解決現有技術的缺點和不足之處，本發明的首要目的在于提供一種用于根系分泌物原位可視化檢測的熒光印跡膜的制備方法。

本發明以植物根系分泌物綠原酸為模板分子為例，以碲化鎘量子點為熒光檢測源，將其包合于以綠原酸為模板、以3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)作為功能單體、以正硅酸乙酯(TEOS)作為交聯劑的分子印跡聚合物中，最后負載于凝膠膜上，設計成原位可視化特異性檢測綠原酸的熒光印跡膜。

本發明的另一目的在于提供上述方法制得的一種用于根系分泌物原位可視化檢測的熒光印跡膜。

本發明的再一目的在于提供一種用于根系分泌物原位可視化檢測的熒光印跡膜的應用。

本發明目的通過以下技術方案實現：

一種用于根系分泌物原位可視化檢測的熒光印跡膜的制備方法，包括以下步驟：

(1)CdTe量子點的制備：

將硼氫化鈉(NaBH₄)和碲粉混合均勻并分散于水中，常溫下避光反應，得到前驅體NaHTe溶液；將氯化鎘(CdCl₂)和巰基乙酸(TGA)溶于水中，調節pH至堿性，通氮除氧，加入前驅體NaHTe溶液，加熱反應，得到CdTe QDs溶液，洗滌，離心，凍干，得到量子點粉末；

(2)采用反相微乳法制備CdTe@SiO₂@MIPs：