[發明專利]基于鹵素中間體的索拉非尼光親和探針分子的制備方法及應用

在審

• 申請號: 202110279550.1
• 申請日: 2021-03-16
• 公開（公告）號: CN113061126A
• 公開（公告）日: 2021-07-02
• 發明（設計）人: 梅姜平;張永飛
• 申請（專利權）人: 無錫海倫生物科技有限公司
• 主分類號: C07D401/12
• 分類號: C07D401/12;G01N21/64;G01N33/533;G01N33/68
• 代理公司: 無錫嘉馳知識產權代理事務所(普通合伙) 32388
• 代理人: 唐維鐵

本發明公開了一種基于鹵素中間體的索拉非尼光親和探針分子的制備方法及應用，涉及生物醫藥技術領域?；邴u素中間體的索拉非尼光親和探針分子的制備方法包括鹵素中間體與疊氮化鈉反應生成疊氮化物，再將疊氮化物與三苯基膦反應得到光親和鏈接體，索拉非尼和氫氧化鈉在無水乙醇中反應得到帶有單羧酸的中間產物，光親和鏈接體和帶有單羧酸的中間產物在EDC·HCl的作用下發生縮合反應，生成基于鹵素中間體的索拉非尼光親和探針分子，其中，鹵素中間體含有光活性基團雙吖丙啶和碘元素。如此設置，索拉菲尼光親和探針分子的制備方法簡單，易于實現，且收率較高，雙吖丙啶與苯基疊氮類、二苯甲酮類等光活性基團相比具有更高的光交聯活性。

技術領域

本發明涉及生物醫藥技術領域，更具體地說，涉及一種基于鹵素中間體的索拉非尼光親和探針分子的制備方法及應用。

背景技術

光親和標記技術自提出到現在已取得了令人矚目的發展，其結合現代分子生物學、細胞生物學、有機化學等多學科的優勢，運用合成的光敏小分子化合物作為工具探針，經特定波長的光照射分解產生高活性的中間體，與其受體活性部位形成特異性的不可逆共價結合。它是分子水平上研究配體與受體相互作用的核心工具之一，對闡明配體與受體相互作用的機理以及藥物先導物的發現有著巨大的推動作用。運用光親和標記技術，大量的與疾病相關的靶點被發現、多種小分子與生物大分子作用的模式被確定，這些信息對合理設計藥物具有非常重要的意義。

基于以上應用，通常都需要探針分子具有較大的摩爾吸光系數和較高的熒光量子產率，用于免疫分析時，與抗原或抗體的結合不應影響它們的活性，這顯然就需要光親和探針分子具有特殊的化學結構。目前，采用光親和標記技術經常被引入的光親和基團包括苯基疊氮類、二苯甲酮類等，但它們的光交聯活性并不高。因此，需要獲得結構和性能優化，光交聯活性更高的具有特異性的光親和探針分子，成為本領域技術人員所要解決的重要技術問題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種基于鹵素中間體的索拉非尼光親和探針分子的制備方法及應用，以獲得結構和性能優化，光交聯活性更高的具有特異性的光親和探針分子。本發明提供的諸多技術方案中的優選技術方案所能產生的諸多技術效果詳見下文闡述。

為實現上述目的，本發明提供了以下技術方案：

本發明提供了一種基于鹵素中間體的索拉非尼光親和探針分子的制備方法，包括以下步驟：

1)將所述鹵素中間體溶于DMF(N,N-二甲基甲酰胺)中，向溶液中加入疊氮化鈉，在70℃的條件下攪拌反應5h，加水淬滅，再通過乙酸乙酯萃取出有機相，經過飽和食鹽水洗滌、無水硫酸鈉干燥，采用柱層析法分離得到疊氮化物，其結構式為：

2)將所述疊氮化物溶解在THF(四氫呋喃)和水的混合溶液中，THF和水的體積比為10∶1，向混合溶液中加入三苯基膦，室溫下攪拌反應24h，向反應混合物中加入鹽酸，并用乙醚萃取以除去副產物，然后向反應混合物中加入氫氧化鈉，再通過乙醚萃取得到光親和鏈接體，其結構式為：

3)將索拉非尼和氫氧化鈉溶于無水乙醇中，在80℃的條件下密閉反應8h，調節反應后的溶液為弱酸性，加入二氯甲烷萃取出有機相，再經過飽和食鹽水洗滌、無水硫酸鈉干燥后去除溶劑二氯甲烷，采用柱層析法分離得到帶有單羧酸的中間產物，其結構式為：

4)將所述帶有單羧酸的中間產物溶于無水四氫呋喃中，然后加入EDC·HCl(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽)和HOBt(1-羥基苯并三氮唑)，再逐滴加入DIPEA(二異丙基乙胺)，在冰浴條件下攪拌1h后加入所述光親和鏈接體，室溫條件下攪拌反應24h，得到索拉非尼光親和探針分子，其結構式為：

其中，所述鹵素中間體的結構式為：