[發明專利]一種牛胎盤細胞外泌體凍干粉及其制備方法

在審

• 申請號: 202110275136.3
• 申請日: 2021-03-15
• 公開（公告）號: CN113018245A
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發明（設計）人: 陳海佳;姜交華;李學家;徐記旺;龐可亮;陳東煌
• 申請（專利權）人: 廣州賽萊拉生物基因工程有限公司;廣州賽萊拉干細胞科技股份有限公司
• 主分類號: A61K8/99
• 分類號: A61K8/99;A61K8/98;A61K8/34;A61K8/60;A61K8/64;A61K8/44;A61K8/49;A61K8/02;A61Q19/08
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 王歡

本發明涉及護膚品技術領域，尤其涉及一種牛胎盤細胞外泌體凍干粉及其制備方法。本發明以甘露醇、海藻糖、甘氨酸、甘油、吐溫、白蛋白和水組成的賦形劑結合本發明制備工藝，制備的牛胎盤細胞外泌體凍干粉具有良好的穩定性和生物學活性，在常溫下的能夠保存較長時間。實驗表明，常溫25℃保存6個月后牛胎盤細胞外泌體仍然保持良好的完整性和生物學活性，適用于牛胎盤細胞外泌體的長期保存、運輸和應用。

技術領域

本發明涉及護膚品技術領域，尤其涉及一種牛胎盤細胞外泌體凍干粉及其制備方法。

背景技術

動物胎盤其內含有多種生物活性物質如蛋白質、氨基酸、免疫調節肽、礦物元素、維生素及多種功能因子等，這些活性物質具有調節機體免疫、抗應激、抗氧化等功效,他們使用也有較長的時間和范圍，例如牛、羊等動物胎盤制品已收錄至《化妝品已使用原料目錄》，有水解胎盤(牛)提取物(HYDROLYZED PLACENTAL PROTEIN)，動物胎盤蛋白(PLACENTALPROTEIN)等多種。

胎盤中富含各種類型的干細胞，其分泌的外泌體(exosome)，一種直徑在30-150納米的囊泡，包含有多種類型的核酸和蛋白，可以起到信號傳導，免疫調節，營養物質傳遞的功能，近年來成為美容及科研領域的熱點，國內外已應用到化妝品、醫療器械、醫學美容、醫藥等多個領域。越來越多的研究表明，干細胞外泌體能夠參與細胞結構的維持運動信息交流以及組織修復與再生，具有較好的抗光老化、抗氧化、抗皺、美白肌膚、傷口愈合、細胞修復等功效。外泌體的這些作用使得其在治療心肌梗死，皮膚創傷等組織損傷中存在良好的應用前景，并且已經有較多深入的研究。

凍干粉是采用真空冷凍干燥法將物料除去水分后的粉末狀固體。真空冷凍干燥法廣泛應用于藥物生產，主要工藝是在低溫度下使物料完全凍結，活性物質與保護劑形成穩定的固體骨架，然后在高真空、溫條件下使固態的冰晶直接升華，采用冷凝的方法捕捉升華的水汽，致使物質脫水干燥。凍干粉質地疏松多孔，定量準確，無污染，可避免活性物因高熱而分解變質；加注射用水后能迅速恢復原來的特性；同時高真空的環境下活性物不易氧化，有利于產品長期貯存，是藥物針劑常用劑型。

在化妝品行業，很多具有生物活性的植物來源或生物工程來源物質在化妝品體系中穩定性差，易降解變質，而真空冷凍干燥技術的廣泛發展和普及很好的解決了這個問題，凍干粉類化妝品也應運而生。因為其高度的穩定性和運輸、儲存、使用的便捷性，隨著真空冷凍干燥技術的普及和成本的降低，凍干粉現在已成為化妝品常用形式，通過添加不同活性物質起到不同的護膚功效。

基于動物胎盤的生物活性，多種動物胎盤提取物收錄在中國化妝品原料目錄和CFDA已使用化妝品原料名稱目錄。胎盤中分布有大量的間充質干細胞，具有很高的生長及分泌活性。大量臨床前試驗證明了干細胞分泌的外泌體的安全性，國際上外泌體主要應用于創新治療皮膚損傷和化妝品，已有含有外泌體的面膜及外用凝膠藥物上市。

外泌體轉化應用，關鍵在于生產安全合格的規模化外泌體及其穩定保存。目前針對外泌體設計的凍干方法，雖能一定程度上保存外泌體的活性，但試劑的成份復雜，制備較繁瑣，外泌體活性并不穩定，并不利于外泌體產品質量的控制。因此，亟需一種成分簡單、能在常溫下長期保存外泌體且不影響其活性的凍存保護試劑及方法。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種牛胎盤細胞外泌體凍干粉及其制備方法，該凍干粉具有良好的穩定性和生物學活性，在常溫下的能夠保存較長時間。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供一種牛胎盤細胞外泌體凍干粉的制備方法，包括以下步驟：

將牛胎盤細胞外泌體與賦形劑混合，得混合液：

將混合液預凍，制冷，抽真空，解析干燥；

所述賦形劑由甘露醇、海藻糖、甘氨酸、甘油、吐溫、白蛋白和水組成。