[發明專利]一種牛胎盤細胞外泌體凍干粉及其制備方法

在審

• 申請號: 202110275136.3
• 申請日: 2021-03-15
• 公開（公告）號: CN113018245A
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發明（設計）人: 陳海佳;姜交華;李學家;徐記旺;龐可亮;陳東煌
• 申請（專利權）人: 廣州賽萊拉生物基因工程有限公司;廣州賽萊拉干細胞科技股份有限公司
• 主分類號: A61K8/99
• 分類號: A61K8/99;A61K8/98;A61K8/34;A61K8/60;A61K8/64;A61K8/44;A61K8/49;A61K8/02;A61Q19/08
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 王歡

1.一種牛胎盤細胞外泌體凍干粉的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

將牛胎盤細胞外泌體與賦形劑混合，得混合液：

將混合液預凍，制冷，抽真空，解析干燥；

所述賦形劑由甘露醇、海藻糖、甘氨酸、甘油、吐溫、白蛋白和水組成。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述賦形劑由以下質量百分比的組分組成：

2.0％-10.0％甘露醇、0.1％-1.0％海藻糖、0.05％-1.0％甘氨酸、1.0％-5.0％甘油、0.01％-0.05％吐溫、0.1％-0.5％白蛋白，其余為水。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述牛胎盤細胞外泌體與賦形劑的體積比為1:1。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述預凍為將混合液的溫度降溫至-40℃，保持190min；所述制冷為將預凍后的混合液制冷，1min由-40℃降溫至-50℃。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述解析干燥包括一次解析干燥和二次解析干燥。

6.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述一次解析干燥為：70min由-50℃升溫至-15℃，保持5小時；60min由-15℃升溫-10℃，保持5小時；60min由-10℃升溫-5℃，保持5小時；60min由-5℃升溫0℃，保持220min；

所述二次解析干燥為：40min由0℃升溫至30℃，保持500min，控制真空度為0.19bar；30℃保持120min，控制真空度為0.0002bar。

7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述牛胎盤細胞外泌體由以下方法制備得到：

取健康牛胎盤組織勻漿，-80℃冷凍后反復凍融2-3次；

勻漿液常溫解凍后進行第一超聲處理，過濾，濾液-80℃冷凍保存；

濾液常溫解凍，離心，上清液進行第二超聲處理，0.22um微孔濾膜過濾，獲得牛胎盤細胞外泌體。

8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述勻漿為：用PBS緩沖液沖洗牛胎盤，切成小塊，置于勻漿機中勻漿；在所述勻漿之前還包括對牛胎盤進行預處理的步驟；所述預處理為：將胎盤除去羊膜和臍帶，反復沖洗至除凈血液，控干水分。

9.權利要求1～8任一項所述制備方法制得的牛胎盤細胞外泌體凍干粉。

10.如權利要求1～8中任一項所述制備方法制得的牛胎盤細胞外泌體凍干粉或權利要求9所述的牛胎盤細胞外泌體凍干粉在制備抗衰老或修復的化妝品中的應用。