[發明專利]鑒別黃河鯉遺傳性別的分子標記、引物、試劑盒及應用

有效

• 申請號: 202110274546.6
• 申請日: 2021-03-15
• 公開（公告）號: CN113774122B
• 公開（公告）日: 2023-04-28
• 發明（設計）人: 殷戰;翟剛;賈景怡;舒婷婷;賀江燕;婁氣永;石闖
• 申請（專利權）人: 中國科學院水生生物研究所
• 主分類號: C12Q1/6879
• 分類號: C12Q1/6879;C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 武漢卓越志誠知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42266
• 代理人: 胡婷婷

1.一種用于檢測鑒別黃河鯉遺傳性別的分子標記的引物，其特征在于：所述引物為針對鑒別黃河鯉遺傳性別的分子標記的核苷酸序列進行特異性設計的引物，包括上游引物和下游引物；

所述上游引物的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示；

所述下游引物的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3所示；

所述鑒別黃河鯉遺傳性別的分子標記的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示；

所述鑒別黃河鯉遺傳性別的分子標記為黃河鯉雄性特異性序列，其存在于黃河鯉的雄性遺傳性特征區域，但在雌性黃河鯉基因組中缺失。

2.根據權利要求1所述的用于檢測鑒別黃河鯉遺傳性別的分子標記的引物，其特征在于：所述引物的檢測過程為：利用所述引物對待測黃河鯉基因組DNA進行PCR擴增，并檢測擴增片段的長度，再基于所述擴增片段的長度，鑒別所述待測黃河鯉的遺傳性別；

當擴增片段為一條1209bp的條帶時，所述待測黃河鯉含有具有SEQ?ID?NO.1所示核苷酸序列的雄性遺傳性特征區域，鑒別為遺傳性別為雄性的黃河鯉；

當沒有出現擴增條帶時，所述待測黃河鯉鑒別為遺傳性別為雌性的黃河鯉。

3.?根據權利要求2所述的用于檢測鑒別黃河鯉遺傳性別的分子標記的引物，其特征在于：所述PCR擴增的體系為：濃度為50ng/μL的DNA模板1μL、10×?buffer?2μL、濃度為2.5mM的dNTP?1μL、濃度為10μM的上下游引物各0.5μL、濃度為5Units/μL的Taq酶0.3μL，補充水至20μL。

4.?根據權利要求2所述的用于檢測鑒別黃河鯉遺傳性別的分子標記的引物，其特征在于：所述PCR擴增的程序為：94℃?5min；94℃?30s、56℃?30s、72℃?30s，38個循環；72℃5min延伸。

5.一種用于檢測鑒別黃河鯉遺傳性別的分子標記的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒包括權利要求1至4中任一項權利要求所述的用于檢測鑒別黃河鯉遺傳性別的分子標記的引物。

6.根據權利要求5所述的用于檢測鑒別黃河鯉遺傳性別的分子標記的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒的檢測方法為：利用所述試劑盒對待測黃河鯉基因組DNA進行PCR擴增，檢測擴增片段的長度；基于所述擴增片段的長度，鑒別所述待測黃河鯉的遺傳性別；

所述PCR擴增的體系為：濃度為50ng/μL的DNA模板1μL、10×?buffer?2μL、濃度為2.5mM的dNTP?1μL、濃度為10μM的上下游引物各0.5μL、濃度為5Units/μL的Taq酶0.3μL，補充水至20μL；

所述PCR擴增的程序為：94℃?5min；94℃?30s、56℃?30s、72℃?30s，38個循環；72℃5min延伸。

7.?根據權利要求6所述的用于檢測鑒別黃河鯉遺傳性別的分子標記的試劑盒，其特征在于：基于所述擴增片段的長度，當擴增片段為一條1209bp的條帶時，所述待測黃河鯉含有具有SEQ?ID?NO.1所示核苷酸序列的雄性遺傳性特征區域，鑒別為遺傳性別為雄性的黃河鯉；

當沒有出現擴增條帶時，所述待測黃河鯉鑒別為遺傳性別為雌性的黃河鯉。

8.權利要求1至4中任一項權利要求所述的用于檢測鑒別黃河鯉遺傳性別的分子標記的引物，或者權利要求5至7中任一項權利要求所述的用于檢測鑒別黃河鯉遺傳性別的分子標記的試劑盒在黃河鯉遺傳性別鑒定中的應用。