[發明專利]以金色鏈霉菌作為檢測、診斷高血壓的標志物制備相應檢測工具的應用

在審

• 申請號: 202110274048.1
• 申請日: 2021-03-15
• 公開（公告）號: CN112899339A
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發明（設計）人: 馬鑫;周婷婷;翟齊嘯;王志瑋;郭夢婷;劉靚靚;肖望
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06;C12Q1/689;C12Q1/6851;C12R1/49
• 代理公司: 無錫華源專利商標事務所(普通合伙) 32228
• 代理人: 聶啟新

1.以金色鏈霉菌Tü117作為檢測、診斷高血壓的標志物制備相應檢測工具的應用，其特征在于，所述檢測工具的檢測對象為從受試者采集的待測樣品；待測樣品為糞便、腸道組織或腸道內容物。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述金色鏈霉菌Tü117的16S rDNA序列如SEQ No.1所示。

3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，受試者糞便中金色鏈霉菌Tü117的相對含量在1.52以上時，表示受試者具有患有高血壓疾病的可能性。

4.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，當用于高血壓輔助診斷時，其包括以下步驟：

(1)測定標志物即金色鏈霉菌Tü117在受試者待測樣品中的相對含量；

(2)將步驟(1)得到的相對含量與參照值進行比較；

(3)當受試者待測樣品中金色鏈霉菌Tü117的相對含量高于參照值時，受試者具有患有高血壓疾病的可能性。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，步驟(2)中，所述參照值為健康人群的金色鏈霉菌Tü117的相對含量，為0.44-1.52。

6.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述高血壓是檢測到人體的收縮壓≥140毫米汞柱，舒張壓在≥90毫米汞柱的高血壓疾病。

7.一種非診斷目的的權利要求1所述的標志的物檢測方法，其特征在于，所述檢測方法包括以下步驟：

(1)提取受試者待測樣品的總RNA，測定濃度和吸光度；

(2)將步驟(1)獲得的RNA逆轉錄成cDNA；

(3)在熒光實時定量PCR儀上將步驟(2)獲得的cDNA進行擴增；

(4)通過融解曲線和擴增曲線分析，2^-△△Ct法進行相對定量。

8.根據權利要求7所述的標志的物檢測方法，其特征在于，步驟(2)中，逆轉錄的反應程序為：37℃15min，85℃5s，4℃∞；步驟(3)中，PCR反應程序為：預變性95℃30s；擴增95℃5s，60℃30s，40cycles；融解曲線95℃5s，60℃60s，95℃5s，1cycle；降溫55℃30s，1cycle。

9.一種權利要求1-8中任一項應用制備得到的高血壓的檢測工具，其特征在于，所述檢測工具為診斷試劑、芯片、載體或試劑盒。

10.一種收集糞便或腸道組織或腸道內容物用于輔助高血壓判定的數據的方法，其特征在于，對從不清楚是否患有高血壓的受試者或者高血壓的病期不確定的受試者采集的糞便或腸道組織或腸道內容物中的金色鏈霉菌Tü117的含量進行測定。